附录3（示例） XXXXX生物学活性检测 1.
检验目的和原理 本法系XXXXX法测定XXXXX的生物学活性。原理是XXX。 2.
材料和设备 2.1 试剂和材料 试剂盒XXXXX，来源XXXXX。 标准品为XXXXX，来源XXXXX。 细胞株：XXXXX。 培养基：XXXXX。 缓冲液：XXXXX。 样品稀释液：XXXXX。 2.2 设备 净化工作台…… 3.
操作步骤 3.1.
细胞培养：XXXXX细胞XXXXX培养液于X ℃，XCO2培养箱中传代培养。 3.2.
制备细胞悬液：取XXXXX细胞，弃去培养上清，吸取XXXXX清洗残余的培养基，XXXXX无菌离心管中离心，XXXXX弃上清，用XXXXX培养液调整细胞浓度至XXXXX个细胞。 3.3.
接种细胞：将上述细胞悬液混匀后，以XXXXX孔加到96孔细胞培养板中，置于XXXXX培养箱中培养XXXXX h。 3.4.
样品及标准品处理：取XXXXX标准品，按照使用说明书进行溶解并稀释到XXXXX mg/ml，混匀。用样品稀释液逐级稀释待测样品和标准品，以XXXXX μg/ml作为上样起始浓度，XXXXX倍系列稀释，稀释XXXXX个浓度梯度。 3.5.
加样：弃上清，将稀释好的待测样品和标准品加入96孔细胞培养板中，XXXXXμl/孔。置于XXXXX培养箱中培养XXXXX分钟。 3.6.
XXXXX检测（按试剂盒使用说明书进行） 用酶标仪进行读数，以波长570 nm为参比波长，测定在450 nm处的OD值。 4.
结果判定 实验结果须满足以下有效参数为成立： 4.1.
四参数曲线近似“S”形。 4.2.
四参数曲线相关系数（R2）值大于XX。 4.3.
上平台点数不少于XX个，下平台点数不少于XX。 5.
结果计算 5.1.
采用计算机程序或四参数回归计算法进行处理，以待测样品或标准品的浓度对应的稀释倍数为横坐标，以吸光度值为纵坐标，计算样品和标准品的半效稀释倍数。 代入以下公式计算样品的生物学活性：XXXXX 6.
合格标准 生物学活性：应为标示量的XXXXX或结果应为XXX U。
三、文本格式要求 文本格式要求
（一）标题 制造及检定规程标题使用黑体字体，四号，加粗，居中，1.5倍行距；英文、希腊字母和阿拉伯数字使用Times New Roman，四号，加粗。 药品注册标准“国家药品监督管理局”使用黑体二号字，加粗，居中，单倍行距，段前空0.5行；“药品注册标准”使用黑体小二号字，加粗，居中，单倍行距，段前空0.5行。“标准号”加粗，右对齐，单倍行距，段前空1行，中文为宋体，小四号；英文、希腊字母和阿拉伯数字为Times New Roman，小四号。横线长16cm，粗0.75磅，水平居中，垂直距离页边距3.28cm。通用名：汉字使用宋体，四号，居中，1.5倍行距；拼音和英文名使用Times New Roman，四号，居中，1.5倍行距加粗。 （二）正文 正文内容均为1.5倍间距，首行缩进2个字符，中文使用宋体，小四；英文、希腊字母和阿拉伯数字使用Times New Roman，小四。 文中结构层次序数依次使用“1”、“1.1”标注；一级标题加粗。当各级标题单独成行时，结尾不使用标点符号。 （三）附录 如果附录超过3个，需提供附录目录，并按照“附录 1”、“附录2” ……进行编码，字体和字号与正文一致，编号与正文中的附录编号相对应。
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