牛舌草

1.5.2对甲醛性足跖肿胀预防作用大鼠30只，体重176-240g，雌雄兼用，分3组，用药组ig大黄煎液20g/kg，1组ip水杨酸钠250mg/kg，对照用生量盐水，每日1次，连用3日，用药3日后向足跖部sc25%甲醛0.1ml/只，比较致炎后6小时的足肿率。结果对照组为42.4±7.2，大黄组19.5±2.7(P<0.05)，水扬酸钠组26.3±5.3(P=0.05)1.5.3对棉球引起肉芽肿增牛的影响常规方法将大鼠制成模型。各组于术后分别ig生理盐水5ml/只和大黄煎剂10g/kg，另一组用醋酸氢化考的松ip30mg/kg，每日用药1次，第8日处死，取出棉球肉芽肿，烘干后称重，结果对照组棉球干重为98.4±4.9mg，大黄组为71.4±4·3mg(P<0.01)，氢考组为48.5±1.5mg(P<0.001)。

1.5.4对大鼠肾上腺中抗坏血酸含量的影响两组大鼠分别ig生理盐水5ml/只，大黄煎剂40g/kg，2小时后处死动物取出肾上腺，仿Roe氏法测抗坏血酸含量。结果对照组每1g肾上腺组织含抗坏血酸11.5±1.5mg，大黄组含11.2±1.0mg(P>0.05)。

1.5.5对切除双侧肾上腺未成年大鼠存活时间的影响幼年大鼠21只，体重74-100g，雌雄兼用，分成3组，切除双侧肾上腺后，第一、二组分别ig生理盐水2ml/只，大黄煎剂10g/kg，另一组sc醋酸氢化考的松15mg/kg，每日用药1次，观察1周存活动物只数，结果对照组存活1/7，大黄组存活2/7(P>0.05)，氢考组存活7/7(P<0.001)。

1.5.6对切除一侧肾上腺小鼠所致对侧肾上腺代偿性肥大的影响小鼠体重24-26g，雌雄兼用，第一组做假手术，其余各组均切除一侧肾上腺。术后第一、二组ig生理盐水0.2ml/只，第三、五组分别ig大黄煎剂，第六组ip醋酸氢化考的松25mg/kg，每日给药1次，1wk后处死，取对侧肾上腺，称重。结果表明，在大黄煎剂对3种不同炎症模型均有显着对抗作用，对以渗出和肉芽增生为主的炎症过程均有抑制作用，故临床应用大黄治疗多种炎症性疾患所取得的良好效果可能与大黄对炎症过程广泛影响有关。大黄煎剂抗炎性肿胀的作用先于泻下作用，在本实验中未见有利尿作用，其消肿与泻下利尿作用无直接关系。大黄的抗炎作用不以肾上的完整存在为条件，抗炎的同时不降低肾上腺中抗环血酸的含量，故可认为其抗炎作用主要不是通过垂-肾上腺系统。大黄煎剂既不能延长未成年大鼠切除肾上腺后的存活时间，又不能对抗切除一侧肾上腺后致对侧肾上腺代偿性肥大。因此表明，大黄煎剂本身不具有肾上腺皮质激素样作用。

1.5.7大黄对血管通透性的影响采用125I标记人血清白蛋白作放射活性测定，标记物125I-白蛋白经电泳结合率试验，结合力在98%以上。实验动物选用体重20-22g的健康小鼠，按体重配对分为大黄灌药组和生理盐水对照组。动物灌胃后2小时，从ip125I-白蛋白0.1ml(5uci)，30分钟后处死，洗出腹腔液，用FH-408定标器NaI井型闪烁晶体测得放射活性，最后换算成注入量的百分比。血管通透性降低时，测量得的放射活性高，反之则低。结果表明，大黄灌药组的血管通透性低于对照组，即药物对血管通透性有明显的抑制效应，经t值测验p<0.001。用伊文氏蓝染料法测定相似的结果，两法都证明大黄具有降低血管通透性效应。

1.6大黄素抗炎作用机理1.6.1大黄素对白三烯B4和PGE2生物合成的影响花生四烯酸的5-脂氧酶产物白三烯B4(LeukoTCMLIBieneB4，LTB4)是炎症反应的重要介质。它主要由多形核白细胞、巨噬细胞、肥大细胞等产生。白三烯B4可激活中性白细胞的多种反应，其中包括加速炎症介质的产生，并可促进中性白细胞在微血管内皮粘着，进而渗出血管，协同其它趋化因子使炎症反应扩大。它在依赖中性白细胞的炎症反应中起着一种内在放大器的作用，因此寻找LTB4生物合成的有效药物受到重视，为此研究了大黄素对LTB4和PGE2生物合成的影响，以探讨其抗炎作用机理，材料：大黄素临用前以0.01NNaOH溶解，生理盐水或缓冲液(pH8.1)稀释至试验浓度。花生四烯酸(AA)、钙离子载体A23187、PGB2和LTB4标准品均为Sigma公司产品，PGE2放免药盒(国产)，高效液相色谱仪：Perkim-Elmer-3B系列，分析柱250×0.46mmNueleosil-C18等。结果：大黄素对人血PNM合成LTB4及PGE2的影响为在无外源性AA的反应体系中，大黄素明显抑制A23187刺激PNM合成LTB4，抑制作用强度随大黄素浓度增高而增强，其IC50值为6.4×10-6mol/L；对PGE2合成无抑制作用，反而随浓度增大而合成增高。在有外源性AA(终浓度5x10-5mol/L)的反应体系中，大黄素抑制LTB4的作用减弱，但仍呈明显的浓度效应关系，IC50值为2.5x1O5mol/L，大约是前者的5倍，相反，PGE2的产率也随大黄素浓度的增加而递增，其递增斜率比无AA反应体系者为陡。

1.6.2大黄素在体外全血反应体系中对LTB4及PGE2生成的影响大黄素浓度高达1x10-4mol/L时，对人全血中LTB4的抑制率仅为62.3±4.8(n=3)，PGE2的生成量为对照组的101.2±10.1(n=3)。

1.6.3半体内试验，大黄素经体内给药后，可明显抑制兔全血反应体系中LTB4生成，给药5min后抑制作用即达高峰，但很快下降，30分钟后作用基本消失，至90分钟发现明显反跳现象。大黄素对PGE2的生成无抑制作用，PGE2的生成在5-15分钟呈增加趋势，并于15分钟有显着差异，但30分钟后即与对照组无明显差别。

1.6.4体内试验，大黄素(10mg/kg)对正常家兔PGE2的生成无抑制作用，时效曲线的形状与半体内试验相似，血中PGE2的变化规律一致。以上实验结果表明，大黄素在体内外条件下可抑制LTB4生物合成，对PGE2的生成无抑制作用，提示大黄素是一个选择性的花生四烯酸5-脂氧酶抑制剂。这一结果为阐明大黄素的抗炎等机理提供了新线索。

1.7炮制对大黄消炎作用的影响1.7.1对大鼠蛋清性关节肿的影响按常规方法，大黄生品及炮制品煎剂的剂量均为8g/kg，对照组给同体积水，阳性对照用氢考20mg/kg，均为ig给药。大黄冷浸液、大黄煎液、熟军煎液等对在鼠蛋清性足跖肿胀亦有显着的抗对作用。

1.7.2对巴豆油诱发小鼠耳部炎症的影响实验组给大黄生品及炮制品醚提物8g/kg(相当生药量)，对照组用生理盐水，阳性对照用氢化考的松(氢考)20mg/kg，均为ip给药。给药30分钟后，在小鼠耳部正、反两面各涂巴豆油0.05ml，4小时后处死小鼠，取两耳同一部位0.8mm组织，称重，以左、右两耳重量之差作为肿胀指标。

1.7.3对棉球肉芽肿增生的影响大鼠生品及炮制品醚提物对小鼠和大鼠棉球肉芽肿增生的影响：选用30g左右体重雄性小鼠和150-200g雄性大鼠，按常规操作方法。

1.7.4对小鼠胸腺及体重的影响用体重12-18g小鼠56只，等分成7组，大黄生品及炮制品醚提物8g/kg(相当于生药量)，对照组给等容积的生理盐水，阳性对照给氢考10mg/kg，均由ip，每日1次，连续7日，8日摘出胸腺，在组织天秤上称重，比较各组间的差异。

实验结果表明，大黄经炮制后消炎作用受到不同程度的影响，主要是酒炖大黄和大黄炭的消炎作用有所减弱。大黄醚提物8g/kg(相当于生药量)，ip7日后小鼠胸腺明显萎缩，这一现象提示大黄对炎症末期的消炎作用是否与免疫抑制有关。

2.对心血管系统的影响2.1降压作用1938年SupniewskiTV等报道，大黄素对动物有降低血压的作用，其降压作用与剂量有相关性。大连铁道医学院曾报道，急性实验，大黄浸剂和去醇大黄酊剂iv给药，能使家兔血压明显降低。还有报道，大黄水煮酒沉制剂iv给药，可使麻醉犬的血压降低，心肌耗氧量增加，提高心肌氧利用率。波叶大黄多糖，十二指肠给药45mg/kg，可使正常大鼠血压降低20%，心率减慢12%。

2.2对心脏的作用波叶大黄多糖0.86mg/ml，可使正常蟾蜍离体心脏收缩力增加29%，使衰竭离体蟾蜍心脏收缩力增加70%，心输出量增加58%。应用电生理技术研究大黄对蟾蜍心肌收缩力的影响，发现大黄能使离体蟾蜍心脏的收缩力明显增强，心率减慢，(P<0.01)。随药物剂量的增加，心肌活动由兴奋逐渐转为抑制，并出现异位心律，增加细胞外液钾离子浓度，可恢复窦性心律，提示大黄对蛙心的强心作用有可能是通过抑制心肌的Na+-K+-ATP酶而实现的。大黄还可对麻醉犬的心肌耗氧量、氧利用率、心输出量、心搏指数增加，而使冠脉阻力、左室功能等下降。

2.3对离体血管的作用实验采用20只家兔的121条离体血管及22例病人在手术时离体的55条胃肠道血管，置于含有营养液的浴池中，通过换能装置记录血管条的活动及大黄对其影响。药物用大黄醇提液，每1ml含生药1g。结果表明，大黄醇提液具有兴奋这两类离体血管的作用，表现为：提高离体血管条的收缩力，能增强部分血管条的自发节律活动。实验还是显示酚妥拉明能拮抗大黄醇提液对离体血管条的收缩力。

2.4对微循环的影响实验用英国种LACA系健康小白鼠，体重26-34g，大黄及对照组各10只。大黄混悬液(由上海市卢湾区中心医院提供的临床制剂，配制成20%混悬液)以0.25ml/10ig。给药后1、2小时观察微循变化。结果：微动脉：大黄组10只动物；给药l小时后微动脉血流呈线流6只，而出现红细胞聚集呈线粒流者4只，对照组给水1小时后，10只动物全为线流。但统计处理X2测验0.05

2.5对血脂代谢的影响大黄对正常兔血清胆固醇无影响，但对因服胆固醇而血清胆固醇升高则有明显的抑制作用，血清胆固醇和总磷脂比值明显下降。大黄(R.officinale)粗提物ip给大鼠(体重100克左右)，8小时后测定血清胆固醇和尿素氮，结果每只大鼠给于5mg剂量时血清胆固醇十分明显升高。波叶大黄(R.Otaoense)中提取的多糖有明显的降血指作用。Ig波叶多糖(RHP)100和200mg/kg，可分别使蛋黄诱导的高脂血症小鼠血清总胆固醇(TC)降低45%和46%，甘油三脂(TG)降低42%和67%；肝脏TC分别降低63%和65%，TG降低14%和55%，过氧化脂质(MDA)降低49%和66%。igRHP100和200mg/kg对正常小鼠血清TC无明显影响。igRHP45和90mg/kg可分别使高脂饲料诱导的高脂血症大鼠血清TC降低48%和50%，TG降低30%和31%；肝脏TC降低57%和62%，TG降低23%和30%。MDA降低26%和41%。用不同溶剂对大黄进行提取物对大鼠的实验性高胆固醇血症进行降脂试验。结果表明，大黄的醇提部位有明显的降低血清总胆固醇作用。石油醚提取部位作用不显着。

3.对泌尿系统的影响3.1大黄蒽醌衍生物对家兔的利尿作用和肾髓质Na＋-K＋-ATP酶活性的抑制作用。

3.1.1蒽醌衍生物对家兔排尿、排Na＋和K＋量的影响 取体重2kg左右雄金基拉兔，自由饮水，禁食18小时后麻醉，麻醉后以剂量为30mg/kgig给药，药物用0.1mol/LTCMLIBis一HCI缓冲液(pH8.5)新鲜配制。对照组给以同体积缓冲液。(pH8.5)新鲜配制。对照组给以同体积缓冲液。同时用50ml/kg生理盐水ig做水负荷，迅速打开腹腔，抽空膀胱内余尿，从膀胱腹面下部插管，每间隔2小时收集尿液1次。结果：大黄素和大黄酸对家兔排尿、排Na＋和排K＋有明显促进作用。一般在给药后0-2小时排尿量即明显增加，2-4小时达高峰，分别为对照组的5.9和5.8倍(P<0.005)。8-10小时接近对照组水平，排Na＋和K＋量的增多与排尿量平行，给药后2-4小时高峰，Na＋分别为对照组的4.4和4.6倍(P<0.01)；K＋分别为对照组3.2和3.9倍(P<0.005)。而芦荟大黄素和大黄酚的作用较弱，在给药后2-4小时排尿量分别为对照组的2.3和2.4倍(P<0.01)，排K＋为对照组的1.6和2.3倍(P<0.01)，排Na＋量则无显着变化。作图法表明。大黄素和大黄酸的利尿作用与排Na＋作用呈良好线性关系，其相关系数分别为0.992和0.993，而排K＋作用的线性关系较差，分别为0.406和0.790。

3.1.2蒽醌衍生物对Na＋-K＋-ATP酶活性的抑制作用 大黄素、大黄酸和芦荟大黄素对Na＋-K＋-ATP酶活性都有很强的抑制性作用。由Hill方程求得50%抑制率的药物浓度分别为9.8±1.4，11.0±1.9和19.3±2.8ug/ml。用Dixon作图法对大黄素、大黄酸和芦荟大黄进行动力学分析，表明这3种药物对Na＋-K＋-ATP酶活性有较强的抑制作用，其ki值分别为1.30±0.76，1.41±0.63和7.41±1.10x10-6mol/L。 以上实验表明，大黄素和大黄酸对兔肾髓质而Na+-K+-ATP酶活性有较强的抑制作用，而是一种调节酶，肾小管Na+的重吸收是通过Na+-K+-ATP酶的主动转运过程，而大黄素和大黄酸对此酶有很强的抑制作用，致使Na+的重吸收减少，尿中排Na增多，因而达到其利尿作用。

3.2对动物氮质血症的治疗作用机制Wistar系雄大鼠用含0.75%腺嘌呤饲养喂养，制作成慢性肾功能不全模型。大黄为四川雅安出产的雅黄，切碎后，200-300g加水800ml，煎煮后进行过滤，滤液经冷冻减压浓缩后呈黄色粉末，溶于生理盐水中供ip给药或溶于自来水中作饮料。实验方法：在用含0.75%腺嘌呤饲料喂养大白鼠的同时实验组每日每只大鼠ip5mg大黄生理盐水溶液，对照组用生理盐水。给药后d6、12、18、24、30断头处死采血取血清，脏器作生化检查，结果：大黄对血中尿素氮、肌酐的影响大黄组与对照比较尿素氮量有显着降低，尤其是d24降低了35%，血中肌酐量从d6-24与对照相比较降低了12-18%。大黄对门静脉血中氨基氮的影响于d6、18、24测定大黄组的氨基氮含量较对照分别降低18-21%，d30降低42%并有显着差异。大黄对肝、肾中尿素合成的影响肝中尿素量大黄组较对照降低了12-37%，肾中降低19-24%，且肝、肾中尿素合成的减少与血清中尿素氮的减少呈平行降低。大黄对尿中尿素和肌酐的影响第12日开始大黄组尿中尿素排泄量有显着增加，以后并显示增加倾向，对照无多大变化，肌酐排泄量大黄组仅增加5-10%。大黄对血清中游离氨基酸的影响用药组大鼠分别po不同剂量的大黄溶液(5、15、35、55mg)，给药第24日血中游离氨基酸的苏氨酸、丝氨酸、缬氨酸显着上升，亮氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、鸟氨酸显示上升倾向。当每日每只服用大黄饮料55mg时，苏氨酸、丝氨酸、缬氨酸分别上升36%、36%和42%。

上述结果提示，大黄治疗氮质血症的作用原理主要是由于大黄一方面使从肠道吸收的合成尿素原料之一氨基氮的减少；另一方面使血中必需氨基酸浓度升高，利用体内氨基酸的分解产物一氨，合成蛋自质，从而使肝、肾组织合成尿素量减少；再一方面大黄抑制了体蛋白的分解作用，从而使血中尿素氮和肌酐的含量降低。此外，大黄还能促进尿素和肌酐随尿液排泄出体外。

长泽哲郎等亦曾报道，用大黄(R.Officinale)粗提物，给于100g左右体重的大鼠(ip给药)，8小时后测定血清中尿素氮。结果，5mg/只剂量时血清尿素氮十分明显下降，与对照比较P<0.001。有报道用大黄水提物ip给药于100g左右体重大鼠，4-8小时后测定肾中血清尿素氨的浓度下降46-51%。

3.3对大鼠和人类慢性肾衰的预防作用po大黄提取物(RE)对双肾次全切除大鼠中，血清肌酐(SCR)或SCR倒数(SCR-1)上升速度及尿蛋白定量均比对照组显着下降，而尿渗透压则明显升高。肾病理检查发现RE大鼠残余肾间质淋巴细胞浸润比对照组明显减轻。26例慢性肾病人poRE前后的SCR-1和病程的关系进行了长期观察(分别为17.8±8.2mo和20.5±10.4mo)，发现RE治疗后平均相关系数(-0.0036±0.0018)比治疗前(-0.0129±0.0029)明显下降(P<0.05)。结果表明：RE治疗可使大鼠和人类慢性肾衰病程进展得到延缓。RE慢性肾衰进展的预防作用可能与残余肾间质-小管损害减轻有关。

3.4大黄对体外肾小球系膜细胞生长的影响用肾小球系膜细胞培养及(氚标胸腺嘧啶、核苷)(3小时-TdR)、(氚标尿嘧啶核苷)(3小时-UR)和(氚标亮氨酸)(3小时-Leu)掺入技术，研究了大黄对系膜细胞生长及5/6肾切除后血清促肾因子活性的影响。结果表明，大黄蒽醌和大黄酸蒽醌葡萄糖甙加入培养液中，直接抑制系膜细胞生长。大鼠连续一大黄蒽醌0·25g12日后，采集含大黄衍生物的血清也明显抑制系膜细胞DNA和蛋白质合成，但对RNA合成影响不明显。大黄对促肾因子活性本身无明显影响，培养液有无血清促肾因子存在，并不影响大黄对细胞的抑制作用发挥。这种药理作用在体内可能有利于减轻系膜细胞异常增生，减缓残余肾组织肾小球硬化进程，而改善慢性肾功能不全。

3.5炮制大黄对肾功能不全大鼠的影响动物为Wister系雄大鼠，体重200g左右，用0.75%腺嘌呤制成病理模型，大黄用雅黄和炮制大黄粉末加水100℃提取30分钟，滤液冻干。收率各为25%和31.5%，以饮水形式给与喂养腺嘌呤的大鼠，共24日。对照组给与水。测定尿毒症物质血清尿素氮(BUN)、肌酸酐(Cr)、甲基鸟嘌呤(MG)、胍乙酸琥珀酸盐(GSA)等。结果表明：雅黄用20mg，40mg/大鼠·日(100，200mg/kg体重.日)给与大鼠24日后，所测得的指标BUN，Cr，MG，无机磷均下降，钙离子上升，在统计学上均有意义。GSA在20mg给药组有下降趋势、40mg给药组的下降具有统计意义。尿毒症状获得改善。炮制大黄浸膏40mg给药组所测得的指标BUN，Cr，MG，GSA均具有统计学意义的下降，无机磷也是有意义的下降，钙离子具有意义的上升。与雅黄一样也获得尿毒症状的改善。