5.8.6对实验性急性化脓性胆管炎动物的影响实验性急性化脓性胆管炎模型的制备：取体重250-300g的健康SD大鼠38只，雌雄各半，随机分为3组：大黄组、生理盐水组及正常组。用大肠杆菌悬液逆行注入胆管，并分别对3组动物测手术前及术后3日肝胆功能与血清内毒素含量进行随机对比，实验结果表明，大黄具有降低实验动物血浆内毒素含量的作用，从而为中药抗内毒素血症的研究以及临床大黄治疗的药效分析提供了有价值的信息。同时研究表明动物发牛急性化脓性胆管炎时胆汁流量迅速减少，胆汁中胆固醇、胆汁酸及-HCO3含量全面降低，而血清GPT、AKP与内毒素含量显着升高，提示动物的肝脏的分泌、合成以及解毒屏障等机能均处于抑制状态或发生了障碍；由于大黄组动物的胆流量、胆汁中-HCO3含量在术后3日己接近或甚至超过正常，从而提示大黄对造型动物肝胆系统非胆汁酸依存性胆汁分泌功能具有促恢复的作用。 5.8.7对胰脏及各种消化酶的影响a.大黄对急性胰腺炎的作用生大黄煎剂用大黄饮片加水煮沸1-2分钟。过滤，备用，以及大黄冲剂、大黄糖浆、精制大黄片。动物模型有D-乙基硫氨酸引起的大鼠胰腺炎模型；用牛胆酸钠经导管注射造成急性胰腺炎模型；糜蛋白酶诱发的大鼠急性胰腺炎模型和用家犬制成出血坏死性胰腺炎模型。4种大黄制剂对轻、中度胰腺炎的有效率相似，但对重度胰腺炎则大黄糖浆的疗效最差。从大黄中分离出10个有效单体(糖蛋白Ⅰ、糖蛋白Ⅱ、d-儿茶素、没食子酸、低聚糖、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚)对与急性胰腺炎发病直接有关的5种胰酶(胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶、胰磨蛋白酶、胰激肽释放酶、胰脂肪酶)具有明显的抑制作用。用胆汁酸盐胰蛋白酶混合液胰腺导管内注射复制出两种大鼠实验性急性胰腺炎动物模型。用去鞣大黄提取液和大黄游离总蒽醌液以体内给药方式给予动物进行治疗。结果表明：两种药物制剂对急性胰腺炎动物的死亡率无明显影响，但去鞣大黄提取液能显着延长动物存活时间；延缓急性胰腺炎大鼠早期血浆淀粉酶和脂肪酶的上升；加速胰脂肪酶在正常大鼠循环血中活性的清除以及抑制淀粉酶从腹腔至血液的转运。单味大黄对糜蛋白酶诱发的急性水肿型胰腺炎大鼠和用酒精诱发的急性出血-坏死型胰腺炎大鼠均有防止发生和进展的作用，尽管胰腺可出现轻度的水肿。 B.大黄的利胰效应生大黄(R.Palmatum，R.Palmatumvar.Tanguticum)制成50%大黄制剂(水醇浸提制剂)，50%大黄煎剂(水煎剂)和大黄的5种提取物，分别编为大黄1-5，其中黄3又以方法稍异而又分为3a、3b两种。临用前按0.5%g/ml生药的剂量用蒸馏水配制。各种制剂均按1ml/100g大鼠体重作十二指肠内灌注。大黄制剂对胰液淀粉酶的影响。 C.大黄对消化酶的影响：蒽醌衍生物对胰腺4种酶的抑制作用大黄素对胰激释放酶、胰蛋白酶和胰脂肪酶均有很强的抑制作用，IC50分别为31.5ug/ml，40.5ug/ml和46.5ug/ml。牛血清白蛋白(BSA)和烟酰胺嘌呤二核苷酸(NAD+)对大黄素抑制胰蛋白有拮抗作用。动力学研究表明，大黄素对胰蛋白酶的酶的抑制是非竞争性的，Ki值为1.45x10-4mol/L。芦荟黄素对胰激肽释和胰弹性蛋白酶有较强的抑制作用，IC50分别为38.5ug/ml和67.0ug/ml。大黄酸对胰激肽释放酶的抑制作用很强，IC50为26.5ug/ml。大黄酚和大黄素甲醚对上述4种的抑制作用均不明显。生大黄对4种消化酶活性的影响生大黄煎液在试管内及模拟胃肠道的条件下，对胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的活性具有明显抑制作用；对胃蛋白酶活性未见明显影响。炮制大黄对4种消化酶活性的影响：在试管内及近似胃肠道的生理条件下清宁片(Ⅰ)、醋炒大黄(Ⅱ)、酒炖大黄(Ⅲ)、酒炒大黄(Ⅳ)和大黄炭(Ⅴ)对胃蛋白酶的活性没有明显影响；Ⅴ对胰蛋白酶(T)、胰淀粉酶(A)的活性没有明显影响；Ⅲ对T的活性有较弱抑制能力，对A的活性没有明显影响；Ⅲ和V对胰脂肪酶(L)的活性抑制能力最强。Ⅱ对T的活性抑制能力最强。Ⅳ和Ⅰ对A的活性抑制能力最强。当存在血清时，Ⅳ对L的活性抑制能力不明显；Ⅱ有较弱抑制能力。不同炮制品对大黄的牛物活性各具特征，见表89-91。一般来说，其差别不是简单的平行变化，炮制对于改变大黄的某些药性是有意义的。临床应用大黄可考虑大黄不同炮制品的药性特性。大黄不同提取物对胰蛋白酶活性的影响实验表明大黄所含抑制胰蛋白酶的活性成分极易溶于水及稀醇，不溶于或难溶于95%乙醇。大黄水液、稀醇液有明显的抑制胰蛋白酶活性，去掉鞣质后其抑制胰蛋白酶活性不减弱。而大黄提取的总蒽醌甙未显示明显的抑制胰蛋白酶活性。 6.对呼吸系统的影响大黄(R.palmatum)以稀硫酸浸泡水解，氯仿回流提取，并对其酸水液再以氯仿萃取，然后用吐温80增溶配成混悬液，氢氧化钠溶液调至pH8，实验用19-26g小鼠，进行祛痰实验和呼吸道排泄实验，数据表明大黄总蒽醌甙元20g/kg(按生药折算)即可使小鼠酚红排泌量较对照组明显增加，且随剂量加大而增多，表明大黄对小鼠有祛痰作用。阿托品可完全拮抗上述作用，可见大黄增加酚红排泌量的作用是由于M-胆碱受体被激动后促进了气管、支气管腺体分泌引起，并非由血管漏出所致。剪断颈两侧迷走神经后，大黄虽仍能增加酚红排泌量，但较完整动物明显减弱，提示除吸收后分布于呼吸道而发挥直接作用外，还能提高迷走神经的张力，从而促进气管、支气管腺体的分泌。大黄蒽醌衍生物可排泄至呼吸道中，排泄高峰为灌胃给药后2小时。由于渗透压作用携带水分而稀释痰液，亦是其祛痰作用机理之一。初步认为大黄的祛痰有效成分是蒽醌甙元。 7.对免疫功能的影响7.1对免疫的抑制作用7.1.1大鼠每日每只ig大黄6-9g，4-10日后，胸腺、脾、肠系膜、淋巴结等免疫系统普遍变小、减轻，表现为免疫功能减退。 7.1.2大黄煎剂或混悬剂po给药8日，可使小鼠、金黄地鼠和大鼠的胸腺显着萎缩。 7.1.3用生大黄、醋炒小黄、酒炒大黄、酒炖大黄和大黄炭的醚提物，ip给药，相当每1kg体重8g原生药，每日1次，连续7日，小鼠胸腺重量都有不同程度减轻，与生理盐水组对照，除酒炖大黄和大黄炭P>0.05外，其余均有显着差异，与可的松给药相近。 7.1.4大鼠po大黄浓煎液，每日每只相当生药6g，10日后，腹腔巨噬细胞吞噬指数显着降低；T淋巴细胞于服药2日、4日即显着减少；显微分克克度计定量观察血中性白细胞减少，认为大黄除抑制T细胞外，对非特异性免疫细胞也有抑制作用。 7.1.5肠系膜淋巴结3小时-TdR淋 转试验表明，大鼠长期投服大黄，其植物血凝素(PHA)和刀豆素A(ConA)刺激淋巴细胞转化为淋巴母细胞的作用，都明显受到抑制；脾脏3小时-TdR淋转试验，PHA反应略低下，但差异不明显；ConA反应则明显抑制，表明大黄能引起T细胞功能抑制。 7.1.6小鼠长期投服大黄，其溶血空斑试验(PFC)与玫瑰花瓣试验(RFC)都显示免疫机能抑制.7.1.7体外实验去鞣质的大黄煎剂对人血清抗原抗体反应有一定程度的阻断作用，对IgMA、IgMG、IgGD的特异抗原体血凝反应都有阻断作用，以酒炖大黄作用最强，其次为生大黄、醋炒大黄、酒炒大黄、大黄炭最弱；以小鼠抗绵羊红细胞抗体效价为指标，显示生大黄、酒炖大黄都不影响抗体的形成。可见大黄对细胞免疫、体液免疫都有抑制或阻断作用，但似乎并不抑制抗体形成；较长期用药可引起胸腺、脾、淋巴结等免疫器官的萎缩，这显示大黄的免疫抑制作用可能是多层次。 7.2大黄蒽醌衍生物对免疫功能的抑制作用大黄蒽醌衍生物大黄酸、大黄素和芦荟大黄素70mg/(kg·7日)对正常小鼠免疫系统有不同程度的抑制作用，如减轻免疫器宫的重量，减少抗体的产生，抑制碳粒廓清功能和腹腔巨噬细胞吞噬功能，降低白细胞数，抑制2，4-二硝基氯苯(DNBC)所致的迟发型超敏感反应，大黄酸和大黄素浓度为100ug/ml时对体外［3小时］-TdR和［3小时］-Urd参入淋巴结胞也有明显抑作用。 7.3大黄多糖对免疫功能的促进作用从波叶大黄多糖(Rneumhotaoensepolysaccharide，下简称RHP)，igRHP100和200mg/kg能明显增加小鼠脾脏和胸重量，与对照组相比，脾指数分别增加30%和38%，200mg/kg的剂量使胸腺指数增加25%；能促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，吞噬百分数分别比对照组增加38%和61%。200mg/kg的剂量可使吞噬指数增加155%；能促进小鼠碳粒廓清速率，K值分别比对照组增加48%和21.7%；能促进SRBC致敏小鼠血清溶血素形成，HC50分别比对照组增加11%和57%；能促进小鼠抗体形成细胞的生成QHS分别比对照组增加63%和126%。RHP还可明显促进受ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞DNA的合成，最适浓度为20ug/ml，刺激指数为1.61；对ConA活化的脾淋巴细胞蛋白质合成也有明显促进作用，刺激指数为1.56；对ConA诱导的淋巴细胞IL-2产生明显增强作用。RHP对多种外界因素对机体的损害有明显的保护作用。IgRHP150和300mg/kg，可明显抑制S180移植性肿瘤的生长，抑瘤率分别为40%和48%；igRHP100和200mg/kg对60Co-r射线辐射损伤有保护作用。与对照组相比，小鼠死亡率分别降低30%和35%，平均寿命增加2日和3日；对环磷酰胺所致白细胞减少和骨髓微核率增加具有对抗作用。IgRHP100mg和200mg/kg对白细胞下降的对抗率分别为32.6%和51.3，对骨髓微核率增加的对抗率为15.7%和31.6%；ipRHP100和200mg/kg可明显抑制角叉菜胶引起的小鼠足肿胀。与对照组相比，抑制率均提高80%，表明RHP具有抗炎症作用；RHP对四氯化碳所致肝损伤具有保护作用，SGPT分别较对照组降低30.39%和32.03%；RHP可降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠模型的血糖。给药后7小时药物作用最明显。与对照组相比，血糖分别降低58%和53%，表明RHP具有降血糖作用。 8.对内分泌功能的影响8.1大黄的性激素样作用8.1.1大黄可使去势雌大鼠迅速恢复性周期，临床试用，有卵泡激素样功效。 8.1.2以食用大黄素每1kg体重10-100mg给未成熟小鼠注射，其子宫重量的增加并不明显，食用大黄、掌叶大黄的水提物均未见雌激素样作用。 8.1.3雄大鼠每只每日ig6-9g，4-10日，睾丸重量显着比对照组增大。 8.1.4大鼠每只每1kg体重7.5g大黄，ig给药，每天1次，14日后，雌鼠性成熟明显延缓，子宫、卵巢重量明显小于对照组。 8.1.5小鼠每日每只经口给大黄煎剂相当生药0.5g；金黄地鼠每日每100g体重0.7-1.25g；大鼠每只每次0.45-0·75g，每日2次，共8日，小鼠及金黄地鼠的曲精细管内精子发生层有断落、不整现象；金黄地鼠及大鼠性器官皆有萎缩；处女大鼠卵巢萎缩，阴道口延期甚至长期不能洞开。 8.2对实验动物糖尿病的治疗作用用小剂量链脲霉素(25-30mg/kg)及高热量饲料制成Ⅱ型糖尿病大鼠模型，应用大黄进行治疗，结果可解除胰岛素抗性，使红细胞胰岛素受体最大结合力升高，血清胰岛素水平降低；使血清甘油三酯、总胆固醇、极低密度脂蛋白、胆固醇、载脂蛋白B及肝脏过氧化脂质等水平显着下降；并使HDL-Ch/TCH比值升高。肝脏中超氧化物歧化酶活性增加。表明大黄具有消除Ⅱ型糖尿病胰岛素抗性，改善糖、脂代谢的作用，是治疗Ⅱ型糖尿病高脂血症、预防动脉粥样硬化较好理想的药物。 |
