3.分析性能研究 申请人应提交在符合质量管理体系的生产环境下生产的试剂盒进行的所有性能评估验证的研究资料，对于每项分析性能的研究都应包括研究目的、试验设计、研究方法、可接受标准、试验数据、统计方法等详细资料。有关研究背景信息也应在资料中有所体现，包括试验地点、适用仪器、试剂规格、批号和临床样本来源等。分析性能评估的试验方法可以参考相关国内或国外有关体外诊断产品性能评估的指导原则进行。 如申报产品适用不同的机型，需要提交在不同机型上进行评估的资料。如申报产品包含不同的包装规格，需要对各包装规格进行分析或验证。 3.1样本稳定性 样本稳定性研究主要包括室温、冷藏和冷冻条件下的有效期验证。有关样本采集、处理、运输及保存等的详细内容，申请人可参考WS/T 359《血浆凝固实验血液标本的采集及处理指南》或CLSI H21等相关文件，合理选择样本保存条件并通过试验进行分析验证，从而确认样本的效期稳定性。 3.2适用的样本类型 用于分析性能评估用样本应为枸橼酸钠抗凝血浆样本。血浆抗凝剂浓度为105mmol/L～109mmol/L（3.13%～3.2%，通常定为3.2%），与实际临床检测中使用的抗凝剂保持一致，不能使用其他抗凝剂（如草酸盐、肝素或EDTA等）。样本类型包括新鲜样本、冰冻血浆和冻干血浆。评估试验在样本采集后规定时间内不能完成时，推荐使用冰冻或者冻干血浆进行评估，其中冰冻血浆又优于冻干血浆。如果使用冰冻血浆，应保存在-70℃以下，在-20℃保存超过2周即可使某些凝血因子失活，其结果不能和新鲜血浆比较。 3.3校准品的量值溯源和质控品的赋值（如适用） 应提供详细的产品溯源性研究资料，且检测结果的量值应溯源至现行的国家或国际标准品。对于企业内部参考血浆（制造商工作校准品）、试剂盒产品校准品应提供详细的赋值试验资料和溯源性文件等。如包含PT/INR标定血浆，建议参照CLSI H54文件提供详细的赋值和验证过程研究资料。质控品应提供在所有适用机型上的赋值及其靶值范围确定的研究资料。 3.4 ISI标定（PT适用） 对于PT试剂应提供组织凝血活酶（适用于手工法）、组织凝血活酶/仪器特异性的ISI标定的详细研究资料，ISI应通过与WHO凝血活酶国际参考品（international reference
preparation，IRP）比较，并按照WHO指南标准测量程序进行标定。（注：通常，由WHO国际参考品标定企业内部参考试剂ISI，再由企业内部参考试剂对每一批次试剂进行ISI标定）。 3.5准确度 针对本类产品的准确度评价方法主要包括：与国家或国际标准品的相对偏差、方法学比对等方法，申请人可根据实际情况选择以下方法的一项或几项进行研究。 3.5.1相对偏差 用国家或国际标准品测试，重复测试多次，计算均值与标准品标示值的相对偏差，所得结果应符合相应的接受标准。 3.5.2方法学比对 采用参考方法或国内/国际普遍认为质量较好的已上市同类试剂作为比对方法，与拟申报试剂同时检测一批临床样本，通过两者的比对研究和偏倚估计，进行申报试剂的准确度评价。其中，PT、APTT、TT评价样本应包含正常样本及不同病理水平异常样本，FIB样本的选择应尽可能覆盖其分析测量范围并尽量均匀分布。PT试剂应对声称的每一种可报告方式进行方法学比对分析。 除进行上述方法学比对外，PT、APTT试剂还需进一步进行试剂敏感性的评价，具体如下： 3.5.2.1 PT/INR PT试剂预期用于口服抗凝剂的治疗监测时，应选择至少40例接受维生素K拮抗剂（如华法林）治疗的患者样本，其中INR2.0～4.5为30例，INR＜2.0为5例，INR＞4.5为5例，与已上市试剂或参考方法相比，位于治疗区间（2.0～4.0）内的85%样本需满足不超过±0.5INR单位的要求。 3.5.2.2 APTT 用于APTT试剂方法学比对的样本包括正常样本、接受普通肝素治疗患者样本、含狼疮抗凝物样本以及凝血因子缺乏的样本。 APTT试剂预期用于普通肝素治疗的监测时，应通过至少20例接受普通肝素治疗的患者样本进行评价，样本的选择应能覆盖肝素的治疗范围，并注意避免使用体外模拟添加肝素的样本。（注：申请人可参照CLSI H47文件推荐的方法建立监测普通肝素治疗的APTT参考区间。） 3.6精密度 影响精密度的条件包括：操作者、测量仪器、测量程序、试剂批次（lot）、校准（校准品批次，校准周期）、运行（run）、时间、地点、环境条件（实验室温度、湿度、空气质量、管理等）等。 针对本类产品的精密度评价主要包括以下要求： 3.6.1根据各测量条件对检测结果影响程度的分析设计试验方法，进行重复性、实验室内精密度、实验室间精密度、和批间精密度评价，应对每项精密度指标的评价标准做出合理要求，如标准差或变异系数的范围等。一般应设定合理的评价周期，即在多天内进行测试，并在评价过程中考虑纳入前述可能影响精密度的不同条件，不必对每个测量条件进行单独评估，可在试验设计中纳入多个测量条件。 3.6.2精密度的评价应至少选择2～3个水平的血浆样本进行，一般来说应包含正常血浆、高值异常血浆等，并根据产品特性设定适当的精密度要求。 3.6.3 PT试剂应对声称的每一种可报告方式进行精密度评价。 3.7定量限（FIB适用） 建议申请人参照国内相关性能评估文件或CLSI EP17文件推荐的定义和设计方案，对申报产品的定量限（LoQ）进行合理评估和验证。 3.8干扰物质研究 对样本中常见的内源性干扰物质进行检测，如甘油三酯、血红蛋白、胆红素等，确定可接受的干扰物质极限浓度。 外源性干扰物质通常包括常用药物及其代谢物、患者群体使用的药物及其代谢物等，建议申请人充分考虑已报道对类似试剂或测量程序存在干扰的物质，并根据产品特点选择潜在的干扰物质进行验证。 干扰物质研究的样本可采用临床或模拟添加样本进行验证，建议至少包含正常、异常/病理两个水平的样本。 3.9线性区间（linearity interval）（FIB适用） 线性区间的研究，需采用高值和低值样本配制一系列不同浓度的样本。当建立试剂的线性区间时，需配制出较预期线性区间更宽的至少9个左右不同浓度的样本，每个样本进行多次重复检测，根据可接受线性偏差和各浓度的重复性，确定检测次数。采用重复检测均值和预期值进行直线回归分析，建议采用加权最小二乘回归等分析方法，提供散点图、线性回归方程、线性相关系数（r）及线性偏差，判断结果是否满足可接受标准。 当验证试剂的线性区间时，需配制覆盖整个线性区间的至少5个不同浓度的样本，每个样本至少重复检测2次。
|
