3.3检测方法的介绍：含样本采集、校准方法和质控方法、测试步骤、结果计算等； 3.4反应体系研究：含样本采集及处理、样本要求（抗凝剂的选择（如涉及）、样本稳定性包括样本储存条件、储存时间等）、样本和试剂的用量、反应条件（波长、温度、时间等）、校准方法、质控方法等的研究资料； 3.5不同适用机型的反应条件如果有差异应分别详述。 3.6不同样本类型的反应条件如有差异应分别详述。 （三）非临床资料 1.分析性能评估资料 申请人应当提交在生产质量管理体系下生产的不少于三批次的申报试剂进行的所有性能评价的研究资料，包括具体的研究项目、实验设计、研究方法、可接受标准、试验数据、统计方法、统计分析、研究结论等详细资料。性能评估时应将试剂和所选用的校准品、质控品、配套仪器作为一个整体进行评价，评估整个系统的性能是否符合要求。有关分析性能验证的背景信息也应在申报资料中有所体现，包括实验时间、地点、适用仪器名称和型号、试剂名称、规格和批号、所选用的校准品和质控品（名称、规格、批号等信息）、临床样本类型、来源、浓度及其确定方法、处理方法等，体现结果数据和数据的统计分析过程及结论。对血清和血浆样本类型，可进行同源比对，对于尿液样本类型，应单独进行分析性能评估。 性能评估应至少包括试剂空白吸光度、分析灵敏度、准确度、线性、精密度、分析特异性及其他影响检测的因素等。 1.1试剂空白吸光度 用制造商指定的空白样本重复测定，次数不少于2次，记录试剂盒参数规定读数点主波长下的吸光度值（A），结果均值应符合产品技术要求性能指标的要求。 注：空白样本可以是纯化水、生理盐水、零校准液等。 1.2分析灵敏度 可参照CLSI EP17-A对空白限（LoB）、检出限（LoD）、定量限（LoQ）进行研究。 空白限的建立可使用检测零浓度校准品或样本稀释液的方法进行。例如重复测定20次，根据测量结果的平均值（M）和标准差（SD），计算M+2SD及其对应的浓度值。 检出限的确立可采用系列稀释参考品的方法进行。建议使用有证参考物质进行梯度稀释并进行至少60次检测，95%以上的检测结果高于空白限作为检出限。另外，应使用最低检出限或接近最低检出限水平的样本进行检出限的验证。 定量限应考虑总误差（偏倚和精密度）的要求。偏倚可通过检测已知浓度的低水平样本进行估计，例如检测低水平的有证参考物质。如涉及将样本稀释至低浓度水平，应确保稀释液不引起基质效应，且在低浓度区间呈线性。精密度的估计可根据检测试剂及其应用确定其影响因素，一般应至少包括重复性和日间精密度。 LoB，LoD，LoQ的研究需选择多个样本（空白样本、低浓度水平样本、已知浓度的低水平样本），在多天内进行研究。 1.3准确度 对测量准确度的评价依次包括：与参考物质的相对偏差、方法学比对等方法，申请人可根据实际情况选择以下方法的一项或两项进行研究。优先采用与参考物质的比对研究。 1.3.1相对偏差 测试可用于评价常规方法的有证参考物质3次，测试结果记为（Xi），按YY/T 1584中的相对偏差计算公式分别计算相对偏差（Bi），如果3次结果都不超过±15%，即判为合格。如果大于等于2次的结果不符合，即判为不合格。如果有1次结果不符合，则应重新连续测试20次，并分别按照公式（1）计算相对偏差（Bi），如果大于或等于19次测试的结果都不超过±15%，即判为合格。 1.3.2比对试验 用不少于40个在测定浓度范围内不同浓度的人源样品，采用参考测量程序或国内/国际普遍认为质量较好的已上市同类试剂作为比较测量程序，每份样品按待测试剂盒操作方法及比对方法分别检测。用线性回归方法计算两组结果的相关系数（r）及各浓度点（包括医学决定水平处）的相对偏差或绝对偏差，结果应符合以下要求： 1.3.2.1 RBP试剂盒采用的样本浓度至少覆盖（10.0，120.0）mg/L区间；相关系数r≥0.975；（10.0，30.0]mg/L的区间内，绝对偏差应在±3.0mg/L范围内；（30.0，120.0）mg/L的区间内，相对偏差应在±10.0%范围内。 1.3.2.2 URBP试剂盒采用的样本浓度至少覆盖（0.2，10.0）mg/L区间；相关系数r≥0.975；（0.2，1.0]mg/L的区间内，绝对偏差应在±0.15mg/L范围内；（1.0，10.0）mg/L的区间内，相对偏差应在±15.0%范围内。 注：若样本不稳定，一份样本宜在两个系统同时进行测定。待测系统及参考系统需可比，且满足各自质量标准或产品技术要求后，方可进行比对试验。 1.4线性 建立试剂线性范围所用的样本基质应尽可能与临床实际检测的样本相似，理想的样本为分析物浓度接近预期测定上限的混合样本，且应充分考虑多倍稀释对样本基质的影响。建立一种定量测定方法的线性范围时，需在预期测定范围内选择7—11个浓度水平，每个浓度水平重复测定2—4次。例如将预期测定范围加宽至130%，在此范围内选择更多的浓度水平，然后依据实验结果逐渐减少数据点直至表现出线性关系，可发现最宽的线性范围。 用接近线性范围上限的高浓度样本和接近线性范围下限的低浓度样本，混合成至少5个稀释浓度（Xi）。用申报试剂分别测试以上样本，每个稀释浓度测试3次，分别求出每个稀释浓度检测结果的均值（Yi）。以稀释浓度（Xi）为自变量，以测定结果均值（Yi）为因变量求出线性回归方程。计算线性回归的相关系数（r），结果应符合以下要求： 1.4.1 RBP试剂盒 申请人应该提供RBP试剂盒，线性至少覆盖（10.0，120.0）mg/L区间： a) 线性相关系数r应不小于0.990； b) （10.0，30.0]mg/L的区间内，绝对偏差应在±3.0mg/L范围内；（30.0，120.0）mg/L的区间内，相对偏差应在±10.0%范围内。 1.4.2 URBP试剂盒 申请人应该提供URBP试剂盒，线性至少覆盖（0.2，10.0）mg/L区间： a) 线性相关系数r应不小于0.990； b) （0.2，1.0]mg/L的区间内，绝对偏差应在±0.15mg/L范围内；（1.0，10.0）mg/L的区间内，相对偏差应在±15.0%范围内。 1.5精密度 精密度的评价包括重复性、中间精密度和再现性内容，评价时充分考虑影响精密度的条件：如操作者、测量仪器、测量程序、试剂批次（lot）、校准（校准品批次，校准周期）、运行（run）、时间、地点、环境条件（实验室温度、湿度、空气质量、管理等）等。精密度研究中应至少进行重复性、日间精密度和批间差的研究。精密度研究用样本一般为临床实际检测样本或其混合物，必要时可进行稀释、添加或采用基质合理的质控品。样本浓度一般包括测量区间高、中、低在内的3～5个水平，应有医学决定水平或参考区间上、下限浓度附近的样本。精密度研究可能涉及多天、多地点检测，应确保样本的稳定性和一致性，可将样本等分保存。
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