1.6.2 PNS对猫下肢血管阻力的影响 猫4只(体重1.8±0.5kg),麻醉,从颈总动脉引血液用蠕动泵恒速灌流股动脉,以股动脉血压为血管阻力指标。结果BP下降33±4%(P<0.01),下肢血管阻力下降29±13%P<0.05。 1.6.3 PNS对狗心肺装置的影响 狗4只(体重7.6±1.3kg),按常规制备心肺装置。PNS80mg注入血中,循环血量约400ml。结果CO下降14±7%(P<0.05),BP下降11±4%(P<0.05),HR无明显改变。 1.7 三七根所含人参皂甙Rg1对麻醉犬血流动力学的影响犬26只(体重12.1±2.4kg),麻醉,经股动脉插管并开胸,测量记录平均动脉血压(mAP),CO,总外周阻力(TPR),LVP,左室内压变化速率(LVdp/dt),左室舒张末压(LVEDP),ECG和HR,并求得t-dP/dimax和左室射血的分钟-张力时间指数(TTlxHR)。IvRg110mg/kg/min共5分钟。记录给药前、给药过程中和停药后5、15分钟的上述指标。结果表明,Rg1可使血压短时下降,但LVdP/dtmax和心输出量显着增加,并伴外周总阻力明显下降。 1.8 三七总皂甙(PNS)对心肌细胞Ca(2+)内流的影响1.8.1 PNS对离体豚鼠右室乳头状肌动作电位(AP)和收缩力(Fc)的影响 豚鼠体重348士65g,采用累积浓度给药法,观察PNS5-400ug/ml作用20分钟对快反应AP和Fc作用的量效关系。另单用PNS80ug/ml作用40分钟,观察PNS对快反应AP和Fc作用的时效关系与洗脱,再引出慢反应AP,稳定50分钟后开始给药,观察PNS200ug/ml对异丙肾上腺素(Iso)和组织胺(H)诱发慢反应AP的影响,并观察Ca(2+)。对PNS作用的影响。结果表明,PNS在5-400ug/ml对离体豚鼠右心房乳头状肌快反应AP的上升幅度(APA)和Vmax未有显着影响,但使心肌快反应AP的复极时程APD90、APD50和APD20均有缩短,心乳头状肌收缩也相应减弱。PNS剂量和效应呈负相关(APD90:r=-0.9798;APD50:r=-0·9291;APD20:r=-0·9474;Fc=-0.9409,P均<0.01)。PNS80ug/ml作用5min,即能使APD90、APD50和APD20缩短至155±14,132±15和80±16ms(P均<0.05)。乳头状肌Fc下降16%(P<0.01=。随时间推移,作用进一步加强,至30min基本达稳定,APD90、APD50、APD20分别缩短至144±14,122±16和74±16ms(P均<0.01=,Fc下降37%。结果还表明PNS200ug/ml在20分钟后可显着降低Iso诱发慢反应AP的APA和Vmax,对APD90和APD50无显着作用。 PNS显着降低H诱发慢反应AP的Vmax和APA,并使APD90和APD50显着缩短。当Ca(2+)提高至3.5mmoL/L时,PNS引起的Vmax和APA下降恢复至未用药用时水平。 1.8.2 PNS对培养心肌细胞45Caa摄取的影响 出生2-4d的Wistar大鼠取心室作心肌细胞培养,测定PNS对培养心肌细胞45Ca摄取的影响,以维拉帕米(Ver)和LaCl3为阳性对照,并与未用药(空白对照)相比较,结果见表28。结果表明,PNS100或400ug/ml对快相和慢相45Ca摄取均有显着抑制作用,指示PNS抑制心肌细胞的Ca(2+)内流。PNS400ug/ml的作用虽较LaCl3mmoL/L弱,但较Verl0umol/L为强。 1.9 三七总皂甙(PNS)的负性变频和变力作用用离体豚鼠左、右心房,有心室乳头状肌,探讨PNS负性变频和变力作用的机理。结果表明PNSI-6mg/ml减慢心率(HR),抑制心肌收缩力,拮抗CaCl2、异丙肾上腺素(Iso)的正性变频、变力作用和缩短动作电位(AP)2相时程,且表现出明显的剂量依赖性和频率依赖性,PNS的负性变频和变力作用性质与维拉帕米类似,与抗Ca(2+)有关。 1.10 三七总皂甙(PNS)对家兔急性脑缺血的保护作用 以低压低灌流方法复制家兔急性脑缺血模型,给药组ivPNS10mg/kg,对照组给予等量生理盐水(Ns),记录缺血60分钟时的最大失血量、皮层脑电图,测定大脑皮层组织水、电解质含量和脑静脉血酶活性变化等。结果表明,给药组的皮层脑电图(EEG)无1例发生严重性抑制,与对照组比较有显着差异(P<0.01);对照组维持低灌流期的最大失血量明显低于给药组(P<0·05),说明PNS能提高大脑细胞对缺血的耐受性。给药组大脑皮层组织Na+含量低于对照组(P<0.05),表明PNS对。钠泵功能有保护作用。给药组脑静脉血乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)活性增高较对照组为轻(P<0.01,P<0.05),提示PNS对缺血脑组织神经细胞膜及血管膜的稳定性有保护作用。 1.11 三七总皂甙(PNS)抗失血性休克及对心脏功能的保护作用1.11.1 PNS对失血性休克的作用 兔20只(体重2.3±0.4kg),随机分2组,局麻,给药组ivPNS200mg/kg溶于5ml/kg生理盐水(Ns),对照组iv等量NS。从股动脉放血至出现失代偿,然后将所放出的血液从股静脉输回,继续观察2小时。记录从首次放血到失代偿开始的时间为代偿时间,在代偿过程中放出的总血量为最大失血量,以及回输血后1-2小时的血压水平。 结果表明,PNS明显延长代偿时间,给药组最大失血量明显多于对照组,在回输血液后2小时的血压亦明显高于对照组,说明PNS可使机体对失血的耐受性增强,减轻失血性休克失代偿期对机体的损害,增强机体抗失血性休克的能力。 1.11.2PNS对失血性休克失代偿期心功能的保护作用兔10只,麻醉,分2组,记录左室内压,心室内压变化速率(dP/dt),心输出量(CO),Ⅱ导联心电图(ECG),心率(HR),测量左室内压上升及下降速率峰值(+dP/dtmax;-dP/dtmax),并求出外周血管总阻力(TPR)。给药组ivPNS200mg/kg,对照组iv等量NS,仿前述复制失血性休克,从失代偿开始后1,5,10,15,20,25,及30分钟测上述各指标,结果给药组在休克失代偿后30分钟内,其CO、左室压峰值及左室内压变化速率基本恢复到休克前水平。而对照组的上述各项指标则显着下降,尤以失代偿后30分钟时为最明显。失代偿后的30分钟内,给药组的外周血管总阻力未上升,与对照组相比,两者差异显着。两组的心电图出现S-T段上抬,以15、20、25及30分钟时为明显。但两组的心率变化无明显差异;给药组失血量31±6ml,与对照组(15±2.2ml)相比差异显着,P<0.01。表明PNS对失血性休克代偿期的心功能有明显保护作用。 1.12三七注射液(血栓通)对大鼠大脑急性缺血缺氧的作用 大鼠16只,体重200-220g,均分2组,结扎大鼠一侧颈总动脉,使之脑部产生缺血后软化灶,给药组结扎后立即ip血栓通100mg/kg,以后每日1次,对照组给生理盐水(NS)。两组分别于结扎后1、3、7、14d处死大鼠2只,光镜下观察脑细胞坏死和恢复的情况,以胶质结节数作为神经细胞坏死的间接指标。表明三七注射液对大鼠缺血后的脑细胞有明显的保护作用。 1.13 三七总皂甙(PNS)对血管平滑肌的作用1.13.1 PNS对猫MBP、HR、MBF、MAR、RBF和RAR的影响猫(体重2.3±0.4kg)麻醉开腹,测量记录平均颈动脉血压(MBP)、心率(HR)、肠系膜动脉血流量(MBF)和阻力(MAR)、肾动脉血流量(RBF)和阻力(RAR),ivPNS25、50、100mg/kg,等量生理盐水(NS)为对照物,观测10分钟,比较给药组与对照组上述指标的变化。结果表明,PNS在明显降低MBP时仍明显增加MBF和降低MAR,说明其明显扩张了肠系膜动脉;对RBF,虽使其短暂减少,但仍使RAR降低,说明PNS也扩张了肾动脉,但强度较扩张肠系膜动脉弱。 1.13.2 三七总皂甙(PNS)和单体皂甙(Rg1、Rb1)对离体兔血管平滑肌(VSM)的影响兔25只(体重2.7±0.5kg),制备胸主动脉(AA)、肺动脉(PA)、肾动脉(RA)、股动脉(FA)、肠系膜动脉(MA)、门静脉(PV)及下腔静脉(IV)等螺旋血管条标本,观察PNS和Rg1、Re、Rb1的作用,并与钙拮抗剂维拉帕米(Ver)比较。结果表明:①1、PNS对VSM静息张力和B2受体无影响,而对由CaC12、KC1、去甲肾上腺素(NE)诱发的VSM收缩与Ver一样具有非竞争性拮抗作用,且拮抗前二者的作用强于后者。PNS对同一激动剂诱发的不同血管收缩具不同的拮抗强度,即对AA、PA作用较弱,对其它血管作用较强,表明PNS扩张VSM作用具血管选择性。②Rg1、Re、Rb1对VSM的作用性质与PNS相同,但强度弱于PNS,作用机制异于PNS,表明是PNS中扩张VSM的有效成分,且相互间具有协同作用。实验还表明Rb1对VSM的抑制作用强于Rg1,这主要因Rb1能阻断胞外Ca(2+)内流,Rg1、Re只抑制胞内Ca(2+)释放收缩相,而VSM收缩时对胞外Ca(2+)依赖较大。 1.14三七总皂甙(PNS)对兔主动脉条收缩反应的影响用离体免胸主动脉条,实验观察PNS对去甲肾上腺素(NE)收缩血管作用的影响,PNS对NE收缩作用中Ca(2+)内流依赖性部分的影响和PNS对KCI收缩血管作用的影响。结果表明PNS使NE收缩血管条的量-效曲线右移并抑制最大效应;PNS明显减弱NE收缩反应中Ca(2+)内流依赖性部分。此外,PNS对高K+去极化引起的Ca(2+)内流无阻断作用。 1.15 三七总皂甙(PNS)对血管平滑肌a受体引起45Ca外溢与内流的影响1.15.1 PNS对45Ca内流的影响狗大隐静脉环,湿重20-40mg,在37℃通O2的缓冲生理溶液(PSS)中平衡,再移入加有PNS和硝苯吡啶的45Ca一PSS中平衡,随后把组织移到含苯肾上腺素等a受体激动剂的45Ca一PSS中。最后把组织移入冰冻的LaCl3溶液中洗脱,称重,加入EGTA液,放置,然后测定组织中45Ca放射活性,并计算45Ca流入组织量。结果表明,0.6g/l浓度的PNS使苯肾上腺素引起的45Ca内流量增高下降到0.14±0.05mmol/kg(n=7),与不加入PNS的苯肾上腺素组相比,两者有明显差异(P<0.01),同样浓度的PNS对KCI引起的45Ca内流无明显影响,而硝苯吡啶几乎完全阻断KCI引起的45Ca内流量。 1.15.2对45Ca外溢的影响0.6g/L浓度PNS对苯肾上腺素明显增加45Ca丢失率的抑制作用不明显。 1.16三七总皂甙(PNS)的降压作用1.16.1对麻醉猫的降压作用猫18只(体重2.6-3.2kg),分5组,麻醉,按不同剂量ivPNS,记录给药前后血压。结果表明,PNS有降低麻醉猫血压的作用,其强度与血压成正比。 1.16.2 对麻醉猫降压作用的快速耐受性猫(2.5-3kg)4只,麻醉,ivPNS60mg/kg,待降压及血压恢复原水平后再给同剂量PNS。结果第一次给药后收缩压与舒张压分别下降18.42-18.91%,第二次给药后降压幅度为原水平的47.43-47.06%,第一、二次降压强度比率为:收缩压1:2.5,舒张压1:24,表明PNS对麻醉猫的降压作用无快速耐受性。 1.17三七注射液(每lml相当于1g生药)对兔肺动脉压的降压作用 家兔10只(体重3±0.5kg),麻醉,分离左外颈静脉和右颈动脉,插管测定给药前后的肺动脉收缩压(SPAP),肺动脉舒张压(DPAP)和肺动脉平均压(MPAP),颈动脉收缩压(SCAP),颈动脉舒张压(DCAP)和颈动脉平均压(MCAP),并测心率(HR)。Iv三七注射液0.6或0.3ml/kg,每个动物先后进行两个剂量组的实验,结果见表33。结果表明,三七注射液有明显的降低肺动脉压和体动脉压作用,降低心率的作用维持时间极矩,而降压作用维持时间较长。 1.18 三七总皂甙(PNS)升高颈动脉前列腺素I2及降低血小板血栓素A2的作用1.18.1对实验性动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内膜斑块形成的影响1.18.1.1内膜病变及覆盖面积测定 兔28只(体重2.1±0.1kg),分3组:造型组(饲料中每日加胆固醇);PNS组加胆固醇及igPNS100mg/(kg.D)x8周;正常对照组。处死兔,摘出胸主动脉,染色后肉眼定级(分0、0.5、1、2、3、4级),计算内膜上病变覆盖面积。结果正常对照组主动脉内膜光滑无病变检出,AS造型组内膜病变严重,侵犯面积深广,主要为3或4级。PNS组内膜病变比造型组显着减轻,内膜病变覆盖面积比造型组下降81%。 1.18.1.2对动脉壁前列腺素I2(PGI2)含量及血小板血栓素A2(TXA2)含量的影响 Wistar大鼠32只,分4组,1、2、3组分别igPNS25、50、100mg/(kg·日)×l0日,第4组不给药为对照组。疗程结束后麻醉,先摘出一段颈总动脉,处理后测定PGI2稳定型代谢产物6-酮-PGF1a然后腹主动脉穿刺取血,经处理后测血小板中TXA2稳定型代谢产物TXB2。结果PNS3个剂量组,动脉壁6-酮-PGF1a含量均比对照组升高(P均<0.05),而血小板内TXA2含量均下降(P均<0.01)。 1.19三七总皂甙(PNS)对老年大鼠心脑组织脂褐质及血清过氧化脂质含量的影响1.19.1 PNS的抗氧化作用1.19.1.1 PNS对心脑组织中脂褐质含量的影响老年大鼠(18mo,体重94士40g)20只,随机均分2组。给药组喂正常饲料。加igPNS50mg/(kg.日),对照组只喂正常饲料。另设青年对照组(4mo,165±9g)喂正常饲料。持续3mo后取心尖部组织和脑皮质运动区组织制备匀浆测定脂褐质含量。结果表明,老年组心肌脂褐质含量明显高于青年对照组,老年给药组心肌脂褐质含量明显高于青年对照组,老年给药组心肌和脑组织脂褐质含量显着低于老年对照组,给药前后体重与老年对照组比较均无明显差异(见表36)。2、PNS对血清过氧化脂质含量的影响大鼠麻醉处死,腹主动脉取血制备血清,按硫代巴比妥酸(TBA)显色法测定血清过氧化脂质(LPO)含量。结果PNS组血清LPO含量比老年对照组下降了34.5%,差异非常显着。 1.19.1..2 PNS对血清脂质含量的影响 制备好的血清测定血清总胆固醇(Tch)及高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和其亚组分HDL3-C,甘油三酯(TG),并计算HDL-C/Tch比值。结果,服PNS3mo,给药组血清HDLC比对照组高约54.1%,HDL-C高128.6%;HDL-C/Tch比值亦明显大于对照组,差异均十分显着。但血清Tch和TG含量与对照组比较差异不明显。 1.20 三七总黄酮、正丁醇部分和水溶部分对心血管系统和心肌氧代谢的影响 正丁醇部分为总提物经氯仿提取后的水层,再经正丁醇提取后的母液,不含皂甙。水溶部分为总提物后的残渣加水提取物,仅含1.2%三醇甙。犬(12-22kg体重),麻醉,连接测试仪器,iv不同剂量药物,测量记录给药前后的主动脉均压(BP),左心室收缩压(LVP),左心室压力上升最大速率(LVdP/dtmax),主动脉血流(CO),冠脉血流(CBF),股动脉血流(FBF),Ⅱ导联心电图(ECG),心率(HR),冠状窦和股动脉血氧饱和度并计算心肌氧消耗量和氧利用率。结果表明,三个提取部位均能降低BP和减慢HR。总黄酮和水溶部分可使冠脉阻力(CR)降低,分别为32±10%和27±6%,对股动脉则无明显影响。总黄酮和水溶部分使LVP和LVdP/dtmax明显降低,以总黄酮作用力强,作用可维持30分钟以上;总黄酮和正丁醇部分可不同程度的降低心脏作功指数(LVWI),总黄酮还能明显降低心肌氧消耗量和氧利用率,具有改善心肌氧代谢作用。 1.21 三七绒根提取物(76017,临床试用暂定名为三七冠心宁)对心血管的作用1.21.1对开胸麻醉猫冠脉流量、心率、血压及心肌耗氧量的影响 猫(体重2.3-3.5kg)7只,麻醉,开胸插管,记录冠状窦流量、颈动脉血压、心率,iv7601725-50mg/kg,给药后不同时间重复测量上述指标,并于给药前后抽血测血氧含量。结果显示给药后3-5分钟冠脉流量增加最明显,最高增加79%。以后流量虽渐减少,但在15分钟内,仍比给药前多,但差异不显着(P<0.05)。Iv76017的初期,血压呈现暂时性下降,血率也略有减慢。给药后心肌耗氧量明显减少,由8.29±0.43减至6.27±4.1ml%,比给药前平均降低了24.3%P<0.05。 1.21.2 76017对家兔离体心脏冠脉流量、心率及心肌收缩力的影响家兔4只,按Lan-genelorff氏法进行实验,自灌流系统靠近插管处注入2%760170.1及0.2ml,记录给药前后不同时间冠脉流量、心率和心肌收缩曲线。结果表明,小剂量76017可使冠脉流量立即增加,平均增加17.5%,大剂量给药后5分钟和7.5分钟分别增加48%和43%,心率有些减慢,但无统计学意义。给药后1-5分钟内,小剂量组心肌收缩振幅峰值由1.58增加到2.34cm,最高增加48%P<0.05。 1.21.3 76017对家兔离体器官血管灌流量的影响于规定条件下进行离体兔耳、后肢及肾脏的血管灌流,流入2%760170.1ml,直接记录流量滴数,待作用恢复后,再给予加倍量的76017。结果76017小剂量使家兔离体器官血管灌流量很快增加,表明血管显着扩张,约持续5分钟,扩张作用随剂量的增加而加强。小剂量(0.1ml)时,兔肾、耳及后肢分别增加50%、57%和32%,而大剂量(0.2ml)时则分别增加70%、64%和33%。 1.21.4 76017对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响豚鼠(体重300-700g)29只,按改进的Langendorff氏法,对正常离体心脏用垂体后叶素使冠脉收缩后的心脏及纤颤心脏进行灌流,比较给药前后的冠脉流量。结果表明76017可使离体豚鼠心脏冠脉流量增加P<0.01。 1.21.5麻醉犬冠脉血流量及心肌耗氧量1.21.5.1麻醉犬冠脉血流量健康犬13只(体重8-12kg),麻醉开胸,按规定操作,测定给药前冠脉流量、血压、心电。10只犬经十二指肠注入76017100mg/kg,3只犬给予潘生丁2mg/kg为对照组。结果表明,给76017的10只犬冠脉流量增加的高峰期有8只都集中在第2-3小时。给药后冠脉流量最大值较给药前平均增加21.48ml/分钟,比给药前冠脉流量增加57.03%(P<0.01=,且作用持续3小时以上,同时血压和心率较给药前下降。以上作用与潘生丁的结果相似。 1.21.5.2麻醉犬心肌耗氧量6只犬麻醉开胸,测冠脉血流量、血氧饱和度、血氧含量,计算心肌耗氧量。结果给药前后冠脉流量高峰期的血氧含量和动脉静脉氧差几乎没有改变。表明冠脉流量增加的同时,心肌耗氧量也相应地增高,冠脉流量、动脉压、心率变化与上述10只犬相似。 1. 21.6对大白鼠心肌匀浆耗氧量的影响大鼠(体重150-350g),用Warburg检压法参照Richard氏法,杀死后取心脏制成匀浆,加药后按规定操作,计算100mg新鲜心肌组织1h耗氧量。结果0.1%的76017抑制以丙酮酸为底物之耗氧量,增加以琥珀酸为底物之耗氧量。 1.22三七培养细胞(SCC)对心血管系统的作用SCC粗提物ip能增强小鼠耐缺氧能力,增加冠脉流量及减慢心率,对抗去甲肾上腺素收缩主动脉条的作用,对肠管平滑肌有解痉作用。SCC粉末混悬液小鼠ig可缩短出血和凝血时间。 2.对血液和造血系统的作用2.1三七有效成分三七素(Dencichine)的止血作用2.1.1止血活性2.1.1.1 L-构型三七素的止血活性小鼠(体重15-20g)ip不同剂量的三七素(溶于Locke液中),并以Locke液做对照,采用鼠尾静脉切断法,测定出血停止时间和出血缩短时间来表示止血活性。结果表明,以1mg止血活性最强,止血效果随着药物剂量减小而降低。 2.1.1.1.2 D-构型三七素的止血活性试验方法同上,结果显示D-构型剂量1mg时,出血缩短5minn,与L-构型三七素作用相同。 2.1.2增加血小板数的作用2.1.2.1 L-构型三七素的增加血小板数的作用小鼠ip三七素lmg(溶于Ringer一Locke液),并设对照组给Ringer一Locke液,采用直接计数法。结果给药组血小板数为69.6±6·31(万/mm3),和对照组(54.9±3.52)相比,血小板数约增加30%。 2.1.2.2 D-构型三七素增加血小板数的作用试验方法同上,结果D-构型三七素组血小板数为68.0±7.35(万/mm3),与对照组(54.9±3.52)相比约增加24%。 2.2 10%三七注射液的止血作用2.2.1对小鼠凝血时的影响 小鼠(体重18-22g)按比例随机编组,每组60只,给药组ip10%参三七注射液25m1/kg,对照组给生理盐水(NS),分别以毛细玻璃管自小鼠眶内取血10cm,记时,每隔15s将毛细管于砂轮上依次自两端划痕0.5cm并折断,观察凝血,结果给药组凝血时为1.43±0.10分钟,比对照组(2.32±0.17分钟)缩短。 2.2.2 对小鼠小血管出血时的影响 小鼠体重18-22g,按比例随机分组,每组40只,给药组ip10%参三七注射液25ml/kg,对照组给NS。小鼠固定,量尾长,自鼠尾远端1/3处切断,按法记时及终点指标。结果给药组出血时为7.28±0.78分钟,短于对照组的10.63±0.77分钟。 2.3三七提取物对实验性弥散性血管内凝血(DIC)的作用三七提取物为:三七70%甲醇提取物(Ⅰ)醋酸乙醋可溶部分(Ⅱ)正丁醇可溶部分(Ⅲ)水溶性部分(Ⅳ)2.3.1 I对内毒素所致实验性DIC的作用血液内变动 小鼠poI50、100、200mg/kg,lh后iv内毒素,200mg/kg剂量组可见血小板数和纤维蛋白酶原量的减少均被明显抑制。 肝脏的组织学变化 小鼠iv内毒素24h后,给药组的I200mg/kg剂量在肝左叶中央部切片1cm2中出现48±27个出血性坏死病灶,与对照组(155±27个)比较,有显着抑制出血性坏死病灶形成的作用。 2.3.2 I对球蛋白溶解时间(ELT)的作用 给予I的给药组的ELT为187±9min,与对照组的215±15min相比较,I使ELT显着缩短。 2.3.3抗凝血酶作用 以二甲亚砜为对照溶媒,0.5u/ml的凝血酶在204±4s内使0.5%的血纤维蛋白液凝固。500ug/ml的I可使凝固时间显着延长。50-500ug/ml的Ⅱ可使凝固时间显着延长。Ⅲ、Ⅳ未见抗凝血酶作用。 2.3.4对纤溶系的作用 对尿激酶的增强作用,在含有血浆蛋白原的纤维蛋白平板上注入尿激酶与被检液的混合液时,可见Ⅰ、Ⅲ及硫酸葡聚糖对尿激酶呈浓度依赖性增强作用,Ⅱ、Ⅳ对该系统未见增强作用。 2.4云南不同产地、不同规格三七对人凝血酶的影响2.4.1复钙时间测定 分别取人正常血浆与供试品1:1稀释液0.1ml和凝血活酶溶液依次加入试管,混匀,置37℃水浴,加入CaCl2溶液,观察记录出现弥漫白色颗粒的时间为复钙时间。 2.4.2凝血酶原时间测定 分别取正常人血浆与供试品1:1稀释液0.1ml和凝血活酶溶液依次加入试管,混匀,置37℃水溶,加入CaCl2溶液,观察记录血浆凝固时间。 2.4.3第V因子测定 取人贮存血浆与供试品1:1稀释液0.1ml进行试验,其余操作同上。 2.4.4第Ⅶ因子测定 取人正常血清与供试品1:1稀释液作试验,其余操作同上。 2.4.5凝血酶凝固时间测定 用标准凝血酶溶液0.2ml代替夏钙时间测定中的CaCl2,供试品用量为0.2ml,其余操作同复钙时间测定。 结果表明,各产地三七均能影响血液凝固机制。三七的抗凝血作用与产地之间(文山产与其它三地产比较)差异非常显着P<0.001,而不同规格之间则无明显差别。 2.5生三七溶液对小鼠骨髓粒细胞系体外培养的促进作用以日本ICR/JCL纯系小鼠制备小鼠骨髓细胞悬液与199培养液、健马血清、CSF、5%三七溶液、5%琼脂液配成实验用体系。同上法制备一不含三七液的对照组培养体系。培养皿置培养罐中培养7日,先后两批实验,每批n=10。结果表明,5%生三七溶液可促进各型细胞团的生长,其中密型细胞团增殖率可提高60%以上;疏散型细胞团增殖率提高1倍以上;混合型细胞团增殖率较低。 |