4.3.2药物对照品储备溶液的配制 分别取4.3.1.2中17种药物对照品各约10 mg，精密称定，置10 mL棕色容量瓶中，加入甲醇溶解后定容，摇匀，配制成浓度为1 mg/mL的药物对照品储备溶液。 4.3.3高效液相色谱条件（推荐） 4.3.3.1色谱柱：XBridge BEH Shield RP18 2.5 μm 4.6×150 mm，或其他等效色谱柱。 4.3.3.2柱温：35 ℃，样品室温度：10 ℃； 4.3.3.3流速：1 mL/min； 4.3.3.4检测波长：220 nm，扫描范围：190 nm～400 nm； 4.3.3.5进样量：10 μL。 4.3.3.6流动相：A（pH 3.0的磷酸水溶液） B（甲醇：乙腈 1：1），梯度条件见表2。
表2 HPLC法流动相梯度条件
4.3.4系统适应性试验 4.3.4.1 分离度 取4.3.2中17种药物对照品储备溶液各0.1 mL于10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成浓度为10 mg/L的混合对照溶液，取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，17种对照品的色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度应大于1.5。 4.3.4.2 灵敏度 取4.3.2中17种药物对照品储备溶液适量，分别用甲醇稀释至表3中“检出限（LOD）”的浓度，取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，17种对照品的色谱峰信噪比（S/N）均应大于3:1。 表3 17种药物灵敏度要求
4.4高分辨液质联用法 4.4.1 仪器与试剂 4.4.1.1 仪器 高分辨液质联用仪 4.4.1.2 试剂 a）甲醇：质谱纯，CAS# 67-56-1； b）乙酸铵：质谱纯，CAS# 631-61-8； c）17种药物对照品同4.3.1.2 d）。 4.4.2对照品溶液配制 同4.3.4.1中浓度为10 mg/L的混合对照溶液配制。 4.4.3色谱条件（示例） 4.4.3.1色谱柱：Hypersil Gold 100×2.1 mm 1.9 μm，或其他等效色谱柱。 4.4.3.2 柱温：40 ℃，样品室温度：10 ℃； 4.4.3.3 流速：0.2 mL/min； 4.4.3.4 检测波长：220 nm； 4.4.3.5进样量：2 μL。
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