4.7 根据现场消毒评价对象选择合适的微生物种类进行评价，见表 1。 4.8 现场消毒效果评价应记录地点或对象、采样时间、数量、采样者、样本编号、名称、检验指标及依据、检验结果及判定等信息。 表1 评价对象及微生物种类
5 现场消毒效果评价方法 5.1 现场评价 5.1.1 物体表面采样及检测方法 5.1.1.1 试验器材 磷酸盐缓冲液 (PBS，0.03mol/L，pH7.2)、采样液（在PBS中加入相应中和剂）、中和剂（经鉴定试验合格者）、无菌棉签、无菌规格板(5.0cm×5.0cm)、胰蛋白胨大豆琼脂培养基等。 5.1.1.2 布点要求 以桌面、地面、墙面、床头柜、便器、门把手等高频率接触物体表面为重点采样对象，在消毒因子难以达到的地方如抽屉、地毯、墙角等可增加采样点，每类采样对象采集样本不少于2个。消毒前、后采样点应成对设置，不得在同一区域内进行。采样总数不少于30个。 5.1.1.3 采样方法 5.1.1.3.1 消毒前采样：用无菌规格板放在被检物体表面，用浸有采样液的棉签 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5 次，并随之转动棉签，以无菌操作方式将棉签采样端剪入盛有 10mL 无菌采样液的试管内。不适宜用规格板的小型物体表面（如儿童玩具、门把手、热水瓶把等）可按件采样。 5.1.1.3.2 消毒后采样：消毒至设定时间后，在消毒前采样点附近类似部位或同类物体进行，其步骤和方法同消毒前采样。 5.1.1.4 菌落计数 消毒前、后样本于 4h 内送实验室进行检测。将采样管在混匀器上振荡 20s 或用力振打 80 次，吸取1.0mL 待检样品接种于无菌平皿，每一样本接种2个平皿，加入已溶化的 45℃～48℃的胰蛋白胨大豆琼脂培养基 15mL～18mL，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 36℃±1℃，培养 48h，记录菌落数，计算杀灭率。 5.1.1.5 结果计算 按式(1)计算杀灭率： K=(V0-V1)/V0× 100%··············(1) 式中： K—杀灭率 V0—消毒前样本平均菌落数（CFU/每样本） V1—消毒后样本平均菌落数（CFU/每样本） 5.1.2 空气采样及检测方法 5.1.2.1 试验器材 营养琼脂培养基、含相应中和剂（经鉴定合格）的营养琼脂培养基等。 5.1.2.2 采样方法 5.1.2.2.1 消毒前采样：将拟消毒房间的门窗关好，在无人条件下静止 10min 后，室内面积≤30m2，在对角线内、中、外3点各放置一个无菌营养琼脂平板，高度为 0.8m～1.5m，内、外部位应距墙壁≥ 1m，打开平板盖，暴露一定时间后盖好。各平板应做好标记。如室内面积＞30m2，每增加 10m2增设 1 个点。采样点应避开通风口、通风道等。 5.1.2.2.2 消毒后采样：空气消毒达到规定的时间后，在消毒前采样的相同位置上，另放一组加相应中和剂的营养琼脂平板。放置方法和暴露时间与消毒前采样相同。同时取 2 个未经采样的相同平板作为阴性对照。 5.1.2.3 结果计算 按式(1)计算杀灭率。 5.1.2.4 注意事项 消毒前空气自然菌平均菌落数≤10CFU/（皿·10min）时，可不计算杀灭率，消毒后空气自然菌平均菌落数≤4CFU/（皿·10min），判为消毒合格。
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