（规范性附录） 培养基和试剂 A.1 营养肉汤培养基 蛋白胨 10.0 g 牛肉膏 5.0 g 氯化钠
5.0 g 蒸馏水加至 1000 mL 以上各成分蒸馏水溶解，调 pH 至 7.2～7.4，于 121 ℃压力蒸汽灭菌 20 min 备用。 A.2 合成肉汤培养基 L-胱氨酸 0.05g DL-蛋氨酸 0.37g L-精氨酸 0.40 g DL-组氨酸 0.30 g L-赖氨酸 0.85 g L-酪氨酸 0.21 g DL-苏氨酸 0.50 g DL-缬氨酸 1.00 g L-亮氨酸 0.80 g DL-异亮氨酸 0.44 g 氨基乙酸 0.06 g DL-丝氨酸 0.61 g DL-丙氨酸 0.43 g L-谷氨酸 1.30 g L-天冬氨酸
0.45 g DL-苯丙氨酸 0.26 g DL-色氨酸 0.05 g L-脯氨酸 0.05 g 氯化钠
3.00 g 氯化钾
0.20 g 硫酸镁
0.05 g 磷酸二氢钾 1.50 g 磷酸氢二钠
4.00 g 盐酸硫胺素
0.01 g 烟酰胺
0.01 g 蒸馏水加至
1000 mL 以上各成分蒸馏水溶解，调 pH 至 6.9～7.3，于 121 ℃压力蒸汽灭菌 20 min，冷却至室温后，加入0.1 mL 无菌 10%葡萄糖溶液备用。 A.3 液体硫乙醇培养基 酪蛋白胨
15.0g 酵母粉
5.0 g 葡萄糖 5.0 g 硫乙醇酸钠
0.5 g L-胱氨酸 0.5 g 氯化钠
2.5 g 刃天青
0.001 g 蒸馏水加至
1000 mL 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节 pH 为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调 pH 至 6.9～7.3，分装于 115 ℃压力蒸汽灭菌 20 min 备用。 A.4 Letheen 肉汤培养基 酪蛋白胨
10.0 g 牛肉膏
5.0 g 吐温-80 5.0 g 卵磷脂
0.7 g 氯化钠
5.0 g 蒸馏水加至
1000mL 以上各成分蒸馏水溶解，调 pH 至 6.8～7.2，于 121 ℃压力蒸汽灭菌 20 min 备用。 A.5 胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA） 胰蛋白胨
15.0 g 大豆蛋白胨 5.0 g 氯化钠
5.0 g 琼脂 16.0
g 蒸馏水加至
1000 mL 以上各成分蒸馏水溶解，调 pH 至 7.2～7.4，于 121 ℃压力蒸汽灭菌 20 min 备用。 A.6 磷酸盐缓冲液 （PBS，0.03mol/L） 无水磷酸氢二钠 2.83
g 磷酸二氢钾
1.36 g 蒸馏水加至
1000 mL 以上各成分蒸馏水溶解，待完全溶解后，调pH至7.2～7.4，于121 ℃压力蒸气灭菌20 min备用。 A.7 标准硬水 (硬度
342 mg/L) 氯化钙 0.034 g 六水氯化镁
0.139 g 蒸馏水加至
1000 mL 以上各成分蒸馏水溶解，待完全溶解后，于 121 ℃压力蒸气灭菌 20 min 备用。 |
