国家药监局关于发布《化妆品中16α-羟基泼尼松龙的测定》

化妆品补充检验方法的公告（2022年 第107号）

　　根据《化妆品监督管理条例》，国家药监局批准《化妆品中16α-羟基泼尼松龙的测定》化妆品补充检验方法，现予发布。

　　特此公告。

　　附件：化妆品中16α-羟基泼尼松龙的测定（BJH 202203）

                            国家药监局

                            2022年11月18日

化妆品中16α-羟基泼尼松龙的测定（BJH 202203）

1范围

本方法规定了化妆品中16α-羟基泼尼松龙的定性和定量测定方法。

本方法适用于膏霜乳类、液体（水）类化妆品中16α-羟基泼尼松龙的定性和定量测定。

2原理

样品经50%乙腈超声提取，采用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测。根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性，定量离子对峰面积定量，以标准曲线法计算含量。

3试剂和材料

除另有规定外，本方法中所用试剂均为分析纯及以上规格，水为符合GB/T 6682规定的一级水。

3.1乙腈，色谱纯。

3.2 50%乙腈：取乙腈（3.1）、水按体积比1:1混合，摇匀。

3.3标准品：16α-羟基泼尼松龙（16alpha-hydroxyprednisolone）标准品，纯度≥98%。标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式详见附录A中的表A.1。

3.4 16α-羟基泼尼松龙标准储备溶液：称取16α-羟基泼尼松龙标准品10mg（精确到0.00001g），置于10mL容量瓶中，用乙腈（3.1）溶解并定容至刻度，摇匀。该标准储备溶液的质量浓度为1000mg/L。置于-18℃冰箱中保存。

3.5 16α-羟基泼尼松龙标准溶液：精密移取16α-羟基泼尼松龙标准储备溶液（3.4）1.0mL，置于100mL容量瓶中，用乙腈（3.1）定容至刻度，摇匀。该标准溶液的质量浓度为10mg/L。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。

4.2 分析天平：感量0.0001g和0.00001g。

4.3 超声波清洗器。

4.4 涡旋混合仪。

4.5 高速离心机。

5试样制备与保存

样品应按照标签标示的贮存条件进行保存。取样前，应检查封口的完整性，观察样品的性状和特征，并使样品混匀。打开包装后，应尽可能快地取出所要测定部分进行分析，取样后，应将样品进行密封保存。

6分析步骤

6.1空白基质提取液

称取空白试样0.2g（精确到0.0001g），置于10mL具塞比色管中，自“加入50%乙腈约9mL”起与样品同法处理（6.4），作为空白基质提取液。空白样品的性状应与待测化妆品尽量基本一致。

6.2基质标准中间液

精密量取16α-羟基泼尼松龙标准溶液（3.5）0.1mL，置于10mL容量瓶中，用空白基质提取液（6.1）稀释至刻度，摇匀，制成16α-羟基泼尼松龙浓度为100μg/L的基质标准中间液。基质标准中间液现用现配。

6.3基质标准系列溶液

精密量取基质标准中间液（6.2）适量，用空白基质提取液（6.1）配制浓度为0.5、1、2、5、10μg/L基质标准系列溶液。基质标准系列溶液现用现配。

6.4样品处理

称取样品0.2g（精确到0.0001g），置于10mL具塞比色管中，加入50%乙腈（3.2）约9mL，涡旋振荡，使试样与提取溶剂充分混匀。超声提取10min，静置至室温，用50%乙腈定容至刻度，摇匀，以10000r/min转速离心10min，取上清液经0.22μm有机滤膜过滤，滤液作为供试品溶液备用（供试品溶液可根据实际浓度进行适当稀释）。

6.5仪器参考条件

6.5.1色谱条件

色谱柱：C₁₈柱（100 mm×2.1 mm，2.7μm），或等效色谱柱；

流动相：A为水，B为乙腈（3.1）。梯度洗脱程序见表1；

流速：0.3mL/min；

柱温：30℃；

进样量：5μL。

表1  梯度洗脱程序

6.5.2质谱条件

离子源：电喷雾离子源（ESI源）；

监测模式：负离子多反应监测模式（MRM），监测离子对及相关参数设定见表2。

表2  16α-羟基泼尼松龙监测离子对及相关参数设定

*为推荐的定量离子。

注：当采用不同质谱仪器时，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。