通常有两种可供药代动力学评价使用的基本方法：标准药代动力学研究方法和群体药代动力学研究方法。 1. 标准药代动力学研究 标准药代动力学研究是药代动力学评价的常用方法。本方法中选择受试者数量相对较少，从每个受试者采集的生物标本数目却较多。对于高变异药物或低年龄段儿科人群，应纳入足够多的样本量，以便对药代动力学参数的变异性进行合理的评估。 通常标准药代动力学研究的每个年龄组每个剂量纳入6～12名受试者。采用单剂量或多剂量给药的方法给予试验药物，在事先设计的采血点和确定的时间段内收集血样本，必要时收集尿样。样本收集的时间段依据药物的吸收和消除半衰期、或PBPK模型预测的药时曲线特征确定。随后对收集的样本中药物及相关活性代谢物的总浓度和/或游离物浓度进行测定。 采用适当的数据处理方法计算AUC、Cmax、CL/F、Vd/F、t1/2等参数，用于描述药物浓度随时间的变化过程。药代动力学数据通常以相关检测指标和/或参数结果的平均值及个体间变异值表示。 制定研究方案时，可参考国家食品药品监督管理总局（CFDA）发布的《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》和国家食品药品监督管理总局药品审评中心（CDE）发布的相关指导原则。 2. 群体药代动力学/药效动力学研究 在儿科人群药代动力学研究中，相对于标准药代动力学研究的频繁采样，群体药代动力学研究（PopPK）方法采用较多数量的受试者（保证足够的样本量）、每名受试者较少的采血点（稀疏采样，sparse sampling）来测定药代动力学指标，更符合儿科特点。 稀疏采样方案应仔细考虑和设计准确的采样时间段，以确保从有限样本量获取最多信息。基于临床和实验室检测的实施条件（例如每名患儿采集的样本数量和分析方法的定量限），采用PBPK模型预测方法有利于优化采样时间段，使得关键药代动力学参数的估计尽可能准确。 在儿科人群中进行PopPK研究所涉及伦理相关的问题相对较少，体现在该方法允许低频率的收集样本，每位受试患儿的取样次数多为2～4次，解决了儿科人群血样收集困难的问题。群体药代研究的受试患儿数量相对较多，不同的患儿可在给药后不同时间点收集样本，也可获得同一名受试者多个数据。通过合理PopPK研究设计，可获得群体及个体的平均值和受试者间及受试者内变异的估算数据。在收集血样和尿样进行药代研究的同时，还可观测药效动力学终点，以便在研究PopPK的同时提供药物浓度与疗效、毒性之间关系的信息。因此，在儿科人群开展PopPK是推荐应用的方法。 开展PopPK研究需着重考虑以下几点： （1）在可行前提下，无论进行单个还是多个研究，研究人群、样本量、年龄分布都应满足可以提供该药物拟在儿科人群各年龄段应用的条件；尽量纳入能代表人口统计学特征及相关疾病的人群。 （2）与健康受试者的PK研究相比，PopPK研究有较高的个体间差异。应科学设计临床样本的采样方案（实际采样点和采样时间表），以便能通过最小的样本数量获得最多的研究信息。 （3）可借鉴药物先前用于成人或其他儿科人群获得的药代动力学参数制定采样方案，外推时要考虑与成人的疾病进程和药物暴露-效应关系的相似性。 设计合理的PopPK研究数据有助于研究者更好地了解药物的剂量-效应关系在成人与儿科人群中是否一致。具体可参考CDE发布的《群体药代动力学研究技术指导原则》和相关指导原则。 3. 样本采集 在儿科人群中进行药代动力学研究时应特别密切监测安全性。采血量和采样频率常常是儿科人群研究中最为关注的问题。 考虑到在儿科人群中收集血样的难度，尽量采用创伤少/无创的采样方法。设计合理的采样时间点和适宜的采血量、优化采样次数以满足样本分析的要求。如果与全血或血浆水平的相关性已经得到证实，也可采用尿样及唾液样本等进行PK研究。 此外，应完整记录采样时间、样本运输和储藏、样本处理方法等信息。 4. 样本分析 测定临床生物样本中药物及其代谢物（具有药理活性的代谢产物）含量时，其回收率、精密度、灵敏度、特异性、重现性和稳定性等均应满足方法学的要求。从伦理学考虑，儿科人群的研究应尽可能减少采血量，因此，在其方法学上应力求建立高敏感度的分析方法。 方法学验证及生物样本分析报告的具体内容可以参考CFDA发布的《药物临床试验生物样本分析实验室管理指南（试行）》。 5. 协变量分析 通常需要获得每个儿科受试者的日常基础生理数据，包括身高、体重、体表面积等，新生儿受试者还要记录胎龄和出生体重；必要时需记录临床试验期间这些生理数据的变化，尤其是当受试者是低年龄段儿童时。同时还需记录反映药物主要清除器官的相关实验室检测指标，合并用药以及近期用药情况。采用适当的研究设计方案和统计学方法考察试验药物的药代动力学参数与这些指标的关系。 6. 数据分析 应围绕试验目的采用科学、合理的数据分析方法。基于儿科人群药代动力学研究的特点，鼓励研究者运用定量药理学的相关知识和工具对数据进行深入分析。可参考CFDA和CDE发布的《化学药物和生物制品临床试验的生物统计学技术指导原则》、《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则》和《群体药代动力学研究技术指导原则》相关原则开展研究。
儿科人群的药代动力学研究应该严格遵守《药物临床试验质量管理规范》（GCP）的原则和要求，并采取更多的措施保障儿科人群的权益，避免不适当的风险，确保符合伦理地实施。儿科人群的临床研究应在充分知情的前提下，遵循风险最小化和痛苦最小化原则。 一般而言，儿科人群的药代动力学研究应该在预期能够获益的儿童患者中进行。为保证参与临床试验的儿童患者从试验中获益，必须保证临床试验方案设计科学，实施规范，确保临床试验数据质量，并且对研究结果能进行合理的解释。研究者和研究机构审查委员会/独立的伦理委员会(IRB/IEC)应熟悉儿科临床试验，安全规范地实施儿科人群药代动力学研究。IRB/IEC的成员和/或咨询专家应在儿科伦理、临床/临床药理、社会心理学方面具有丰富的知识。IRB/IEC应加强对儿科临床研究过程的跟踪审查，保障安全规范地实施。 依据GCP和相关法律规定，临床试验主要伦理学原则是让受试者对参加试验的风险和获益有清楚的了解，能够理解和接受风险，并自愿参加，签署知情同意书。 低年龄段的儿科人群作为受试者时，必须征得其法定监护人的知情同意并签署知情同意书。当儿童有知情同意的能力可以作出参加研究的决定时，还必须同时征得其本人同意。知情同意书应尽量使用儿童能够理解的语言和术语，让儿童全面了解临床试验的相关信息，并自愿参加。 在任何情况下，参加儿科临床试验的受试者及其法定监护人都应被告知有拒绝参加研究或随时退出研究的权利。 （二）风险最小化原则 开展儿科人群药代动力学研究必须尽最大努力预测风险并减少已知的伤害，为受试者提供最好的保护。 在研究开始之前，研究者应该全面了解试验药物有关的临床前毒性和临床不良反应。为做到在儿科人群研究中保证风险最小化，要求研究人员接受良好培训且有丰富的儿科研究经验，包括具备评估和处理潜在的儿科人群不良事件的能力。 在遵循良好临床研究设计的基础上，设计儿科人群药代动力学研究方案时应尽量减少受试者数量和研究步骤，应事先建立应急机制确保在发现未预期的风险时能够迅速中止研究和实施补救措施。 （三）痛苦最小化原则 由擅长低龄患者治疗的临床研究者设计和实施研究，可以将药代动力学研究中重复和有创性检查引起的不适减至最小。 在儿科人群研究中，应该尽量减少采血量和/或静脉采样次数。在方案中应说明采血量和理由。IRB/IEC通常应关注基于研究目的确定的最大采血量(通常以mL/kg或占血容量的百分比表示)。 研究实施中应充分考虑到儿科受试者的心理感受，加强安抚，营造合适的环境，最大程度减少儿科受试者的痛苦。在研究实施过程中应充分尊重儿科受试者及其监护人退出和拒绝进一步参加研究的权利。 儿科临床研究的伦理审查具体可以参考CFDA发布的《药物临床试验伦理审查工作指导原则》。
参考文献： 1.FDA.General Considerations for Pediatric Pharmacokinetic Studies for Drugs and Biological Products .1998. http://www.fda.gov. 2.周海钧主译.药物注册的国际技术要求-临床部分(ICH-E11；http://www.ich.org).北京：人民卫生出版社，2007：359-376. 3.EMEA：Guildline on the Role of Pharmacokinetics in the Development of Medicinal Products in the Pediatricpopulation.2007. http://www.ema.europa.eu/ema. 4.CFDA: 化学药物临床药代动力学研究技术指导原则;2005年3月发布；http://www.sfda.gov.cn. 5.CFDA: 化学药物和生物制品临床试验的生物统计学技术指导原则；2005年3月发布；http://www.sfda.gov.cn. 6.CFDA/CDE（国外指导原则）: 群体药代动力学研究技术指导原则;FDA于1999年2月发布；http://www.cde.org.cn. 7.CFDA: 药物临床试验伦理审查工作指导原则；2010年11月发布；http://www.sfda.gov.cn. 8. CFDA：药物临床试验生物样本分析实验室管理指南（试行）；2011年12月发布；http://www.sfda.gov.cn. 9. CFDA：药物临床试验质量管理规范（GCP）；2003年发布；http://www.sfda.gov.cn. 10. 李家泰主编.临床药理学（第3版）.北京：人民卫生出版社，2007:668-675. |
