（二）过敏性试验方法 1．主动全身过敏试验（ASA） 通常选用体重为300～400克的豚鼠。每组动物数至少6只。设阴性、阳性对照组和受试物不同剂量组，至少包括临床拟用最高剂量或浓度。阴性对照组给予同体积的溶媒，阳性对照组给予牛血清白蛋白或卵白蛋白或已知致敏阳性物质。 选择容易产生抗体的给药途径，如腹腔、静脉或皮下注射，隔日一次，共给药3次，给药体积0.5 ml，末次注射后第14天、第21天分别快速静脉注射致敏剂量的2倍进行攻击。即刻观察动物反应至30分钟，包括症状的出现及消失时间，一般应观察3小时。致敏期间每日观察动物的症状，首末次致敏和激发当日测定动物体重。按表9判断过敏反应发生程度，计算发生率。
表8 过敏反应症状
表9 全身致敏性评价标准
2．主动皮肤过敏试验（ACA） 通常选豚鼠。受试物应与临床拟用制剂一致，应为含活性成分和赋形剂或含透皮促进剂的混合制剂。若受试物为膏剂或液体，则一般不稀释；若受试物为固体粉末，则需与适量水或赋形剂混匀，以保证受试物与皮肤的良好接触。当使用赋形剂时，应考虑其对受试物透皮吸收的影响。应设阳性对照和阴性或赋形剂对照。在致敏接触阶段，应充分保证受试物在皮肤的停留时间（6小时）和接触皮肤的范围。第0、第7和第14天，同样方法给药。末次给药后14天，再次给药激发，给药6小时左右后，观察72小时内皮肤过敏反应情况，并按表10评分，按表11计算发生率。同时应观察动物是否有哮喘、站立不稳或休克等全身过敏反应。 表10 皮肤过敏反应程度的评分标准
表11 皮肤致敏性评价标准
3．被动皮肤过敏试验（PCA） 通常选大鼠，可用小鼠，有时根据试验需要用豚鼠，选择动物时应考虑IgE的出现时间。每组动物数至少6只。应设立阴性、阳性对照组和受试物不同剂量组，至少包括临床拟用最大剂量或浓度。阴性对照组应给予同体积的溶媒，阳性对照组给予牛血清白蛋白或卵白蛋白或已知致敏阳性物质。 选择容易产生抗体的给药方法，如静脉、腹腔或皮下注射等，隔日一次，共给药3～5次；末次致敏后第10～14天制备致敏血清。激发时动物备皮处皮内注射合适稀释度的致敏血清0.1mL，24或48小时后，静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原加等量的0.5%～1%伊文思兰染料共1mL。由于不同种属动物接受含IgE抗体血清后，至能够应答抗原攻击产生过敏反应的时间不同，需注意激发时间选择的合理性。激发注射30分钟后测量皮肤内层的斑点大小，直径大于5mm者为阳性。不规则斑点的直径为长径与短径之和的一半，并提供蓝斑照片。
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