4．豚鼠Buehler试验（BT）和最大化试验（GPMT） 通常选成年豚鼠。受试物组不少于20只、对照组不少于10只。应设立阴性对照组和阳性对照组。推荐的阳性对照物有巯基苯并噻唑，苯佐卡因，二硝基氯苯，331环氧树脂等，也可以使用其他的阳性对照物，但轻－中度的致敏剂在加佐剂的试验中至少30%和不加佐剂试验中至少15%应有反应。 取决于所选择的方法。在Buehler试验中，致敏剂量应当足够高，以产生轻微的刺激性，激发剂量为不产生刺激性的最高剂量。在GPMT试验中，致敏剂量应足够高以产生轻－中度的皮肤刺激性且能很好地全身耐受，激发剂量为不产生刺激性的最高剂量。第0，6～8和13～15天局部给药诱导，第27～28天在未给药部位给药6小时激发。GMPT试验采用皮内注射给药，使用或者不使用佐剂进行诱导，局部诱导5～8天后，第20～22天给予激发剂量24小时，在去除激发剂量24和48小时后读取结果。两种试验方法均在去除药物24和48小时后读取结果。如结果难以判定，一周后再次激发。 一般在致敏后1和24小时及激发后24和48小时观察皮肤红斑、水肿和其他异常反应，按表12进行评分，计算过敏反应发生率。按表13判断过敏反应强度。可根据毒性反应情况适当调整观察时间。同时测定开始和结束时的动物体重。 表12 皮肤反应评分标准
表13 致敏强度
5．皮肤光过敏反应试验 皮肤光敏性试验是根据比较对照组和给药组的反应进行评价。阳性结果时应追加试验，如：与已知阳性物质的比较试验及用其他方法（不加佐剂）进行试验，其中非损伤性试验方法有利于光敏性反应评价。另外，光敏性是光毒性和光过敏性两类混合难分的反应。必要时应追加光毒性试验。试验动物原则上选健康白色豚鼠，每组不少于5只。应设阳性对照药组、阴性对照组和受试物组。 Adjuvant and Strip法：皮内注射FCA、损伤皮肤角质层后涂敷受试物、照射紫外线，以上操作反复5次进行致敏，2周后再次涂敷受试物，照射紫外线激发。 Harber法：涂敷受试物、照射紫外线，此操作隔日一次共3次致敏。3周后再次涂敷受试物，30分钟后照射紫外线激发。 Horio法：涂敷20%月桂醇硫酸钠，再涂敷受试物，立即照射紫外线，此操作每日一次共3次致敏。14天后再次涂敷受试物，照射紫外线激发。 Jordan法：破损皮肤涂敷受试物，1小时后照射紫外线，此操作每周5次，连续3周进行致敏，2周后再涂敷受试物，6小时后照射紫外线，此操作连续2日进行激发。 Maurer法：涂敷受试物，1小时后照射紫外线及可见光线进行致敏。6周和9周后，各3日连续涂敷受试物，30分钟后照射紫外线进行激发。 Morikawa法：为Harber改良法，涂敷受试物，30分钟后照射紫外线，此操作每周连续5天，共2周进行致敏，致敏2周后，涂敷受试物，30分钟后照射紫外线进行激发。 Vinson法：涂敷受试物，照射紫外线，每日一次，连续5次致敏，7～10天后，再次涂敷受试物，照射紫外线激发。 |
