四、实验室检查 (一)实验室操作生物安全要求。根据卫生部《人间传染的病原微生物名录》中的分类,鼠疫菌为二类高致病性病原微生物。对鼠疫菌进行大量活菌操作(如菌冻干种、离心等)以及对动物的感染实验应当在动物生物安全三级实验室内进行;对样本的检测,如对病原菌的分离纯化、生化鉴定、核酸提取、涂片等可以在生物安全二级实验室内进行;非感染性材料的实验,例如不含病原菌的分子生物学、免疫学实验可在生物安全一级实验室内进行。在不同等级的生物安全实验室内进行相关的实验操作,应当在相应等级的设施、设备及个人防护条件下进行。 (二)常规检查。 1.血常规:外周血白细胞总数大多升高,常达20-30×109/L以上,以中性粒细胞为主,还可见红细胞、血红蛋白和血小板减少。 2.尿常规:可见蛋白尿及血尿,尿沉渣中可见红细胞、白细胞和细胞管型。 3.便常规:大便潜血可阳性。 4.凝血功能:肺鼠疫和败血型鼠疫患者在短期即可出现弥漫性血管内凝血,表现为纤维蛋白原浓度减少(小于200mg/dl),凝血酶原时间和部分凝血激酶时间明显延长,天-二聚体和纤维蛋白原降解产物明显增加。 5.血生化:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK/CK-MB)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)等指标检查,可了解肝、肾功能和心肌损伤程度。 6.电解质:血K+、Na+、Cl-水平可根据临床情况随时复查。 7.脑脊液:脑膜炎型病例可表现为压力升高,外观混浊,白细胞常大于4000/mm3,中性粒细胞为主,蛋白明显增加,葡萄糖和氯化物明显下降,脑脊液鲎(Limalus)试验阳性。 8.心电图检查:常出现窦性心动过速,ST段下降。有时出现左右束支不完全传导阻滞。 (三)胸部影像学。肺鼠疫患者的X线片可随着病程的不同阶段而表现不同。早期可见肺内单一或多发的高密度阴影,分布在多个叶段;随着病情进展,可迅速发展为双肺大片实变,甚至“白肺”。 (四)病原学检查。 1.聚合酶链式反应(PCR)方法检测鼠疫特异性基因。 2.鼠疫菌分离培养及噬菌体裂解试验。 (五)抗原检查。 1.鼠疫反相间接血凝试验(RHIA),检测鼠疫F1抗原。 2.酶联免疫吸附试验(ELISA),检测鼠疫F1抗原。 3.胶体金纸上色谱方法,检测鼠疫F1抗原。 (六)抗体检查。 1.鼠疫间接血凝试验(HIA),检测鼠疫F1抗体。 2.酶联免疫吸附试验(ELISA),检测鼠疫F1抗体。 3.胶体金纸上色谱方法,检测鼠疫F1抗体。 五、诊断 (一)诊断依据。 1.流行病学史。 (1)患者发病前10天内到过动物鼠疫流行区。 (2)在10天内接触过来自鼠疫疫区的疫源动物、动物制品、进入过鼠疫实验室或接触过鼠疫实验用品。 (3)患者发病前10天内接触过具有临床表现(1)-(4)特征的患者,并发生具有类似表现的疾病。 2.临床表现。 (1)突然发病,高热,白细胞剧增,在未用抗菌药物或仅用青霉素族抗菌药物情况下,病情迅速恶化,在48小时内进入休克或更严重的状态。 (2)急性淋巴结炎,淋巴结肿胀,剧烈疼痛并出现强迫体位。 (3)出现重度毒血症、休克综合征而无明显淋巴结肿胀。 (4)咳嗽、胸痛、咳痰带血或咯血。 (5)重症结膜炎并有严重上下眼睑水肿。 (6)血性腹泻并有重症腹痛、高热及休克综合征。 (7)皮肤出现剧痛性红色丘疹,其后逐渐隆起,形成血性水泡,周边呈灰黑色,基底坚硬。水泡破溃后创面呈灰黑色。 (8)剧烈头痛、昏睡、颈部强直、谵语妄动、脑压高、脑脊液浑浊。 3.实验室检查。 (1)淋巴结穿刺液、血液、痰液,咽部或眼分泌物,或尸体脏器、管状骨骨髓标本中分离到鼠疫菌。 (2)上述样本中针对鼠疫菌cafl及pla基因的PCR扩增阳性,同时各项对照成立。 (3)上述标本中使用胶体金抗原检测、酶联免疫吸附试验或反相血凝试验中任何一种方法,检出鼠疫FI抗原。 (4)急性期与恢复期血清使用酶联免疫吸附试验或被动血凝实验检测,针对鼠疫FI抗原的抗体滴度呈4倍以上增长。 (二)诊断标准。 1.急热待查。 具有临床表现(1);或具有接触史1项,同时出现临床表现中(2)至(8)中任何一项临床表现者为急热待查。 2.疑似病例。 发现急热待查患者具有接触史(2)或接触史(3),或获得实验室检查结果(3),应当作出疑似鼠疫诊断。 3.确诊病例。 急热待查或疑似鼠疫患者获得实验室检验结果(1),或实验室检验结果(2)和(3),或者实验室检验结果(4),应当作出确诊鼠疫诊断。 (三)临床分型。 1.按临床表现(2)诊断的鼠疫病例,为腺型鼠疫。 2.按临床表现(3)诊断的鼠疫病例,为败血型鼠疫。 3.按临床表现(4)诊断的鼠疫病例,为肺型鼠疫。 4.按临床表现(5)诊断的鼠疫病例,为眼型鼠疫。 5.按临床表现(6)诊断的鼠疫病例,为肠型鼠疫。 6.按临床表现(7)诊断的鼠疫病例,为皮肤型鼠疫。 7.按临床表现(8)诊断的鼠疫病例,为脑膜炎型鼠疫。 (四)排除鼠疫诊断。 1.在疾病过程中确诊为其他疾病,能解释其所有的临床表现,且针对鼠疫进行的所有实验室检测结果均为阴性。 2.在疾病过程中未确诊鼠疫,发病30天后,针对鼠疫进行的抗体检查结果仍为阴性,或达不到滴度升高4倍的标准。 |