6结果与报告 6.1 结果 6.1.1计算同一稀释度的两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数。 6.1.2若有两个稀释度平板 上菌落数均在10 CFU~150 CFU之间,则按照GB 4789.2的相应规定进行计算。 6.1.3若所有平板 上菌落数均大于150 CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。 6.1.4若所有平板上菌落数均小于10CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 6.1.5若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。 6.1.6若 所有稀释度的平板菌落数均不在10CFU~150 CFU之间,其中一部分小于10 CFU或大于150CFU时，则以最接近10CFU或150CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 6.2报告 6.2.1菌落数按“四舍 五人”原则修约。菌落数在10 以内时,采用- -位有效数字报告;菌落数在10~100之间时,采用两位有效数字报告。 6.2.2菌落数大于或等于 100时,前第3位数字采用“四舍五人”原则修约后,取前2位数字,后面用0代替位数来表示结果;也可用10的指数形式来表示,此时也按“四舍五人”原则修约,采用两位有效数字。 6.2.3若空白对照平板上有菌落出现，则此次检测结果无效。 6.2.4称重取样以 CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/ml为单位报告,报告或分别报告霉菌和/或酵母数。 第二法霉菌直接镜检计数法 7操作步骤 7.1检样 的制备:取适量检样,加蒸馏水稀释至折光指数为1.344 7~1.3460( 即浓度为7.9%~8.8%)，备用。 7.2显微镜标准视野的校正:将显微镜按放大率90倍~125倍调节标准视野,使其直径为1.382 mm。 7.3 涂片:洗净郝氏计测玻片,将制好的标准液,用玻璃棒均匀的摊布于计测室,加盖玻片,以备观察。 7.4 观测:将制好之载玻片置于显微镜标准视野下进行观测。一般每- -检样每人观察50个视野。同检样应由两人进行观察。 7.5 结果与计算:在标准视野下,发现有霉菌菌丝其长度超过标准视野(1.382 mm)的1/6或三根菌丝总长度超过标准视野的1/6(即测微器的一格)时即记录为阳性(+),否则记录为阴性(- )。 7.6报告:报告每100个视野中全部阳性视野数为霉菌的视野百分数(视野%)。 附录A 培养基和试剂 A.1生理盐水 A.1.1成分 氯化钠 8.5 g 蒸馏水 1 000 ml A.1.2制法 氯化钠加入1 000 mL蒸馏水中,搅拌至完全溶解,分装后,121℃灭菌15 min,备用。 A.2马铃薯葡萄糖琼脂 A.2.1成分 马铃薯(去皮切块) 300 g 葡萄糖 20.0 g 琼脂 20.0 g 氯霉素 0.1 g 蒸馏水
1 000 ml A.2.2 制法 将马铃薯去皮切块,加1 000 ml蒸馏水,煮沸10 min~20 min。用纱布过滤,补加蒸馏水至1000mL。加人葡萄糖和琼脂,加热溶解,分装后,121℃灭菌15min,备用。 A.3孟加拉红琼脂 A.3.1成分 蛋白胨 5.0 g 葡萄糖 10.0 g 磷酸二氢钾 1.0 g 硫酸镁(无水) 0.5 g 琼脂 20.0 g 孟加拉红 0.033 g 氯霉素 0.1 g 蒸馏水 1 000 ml A.3.2 制法 上述各成分加入蒸馏水中,加热溶解,补足蒸馏水至1 000 mL,分装后,121℃灭菌15 min,避光保存备用。 A.4磷酸盐缓冲液 A.4.1成分 磷酸二氢钾 34.0 g 蒸馏水 500 mL A.4.2制法 贮存液:称取34.0 g的磷酸二氢钾溶于500 ml蒸馏水中,用大约175 mL的1 mol/L 氢氧化钠溶液调节pH至7.2士0.1,用蒸馏水稀释至1 000 ml.后贮存于冰箱。 稀释液:取贮存液1.25 mL,用蒸馏水稀释至1 000 mL,分装于适宜容器中,121℃高压灭菌15 min。 |
