前言 本标准为推荐性标准。 本标准代替WS/T 96-1996《尿中三氯乙酸顶空气相色谱测定方法》，与WS/T 96一1996相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下: ——更改了定量方法，采用外标法定量(见第4章，1996年版的第2章) ; ——更改了仪器操作条件(见5.6， 1996年版的6.1) ; ——更改了标准贮备液的配制(见6. 3，1996年版的4. 5) ; ——增加了方法定量下限(见10.2)。 本标准由国家卫生健康标准委员会职业健康标准专业委员会负责技术审查和技术咨询，由中国疾病预防控制中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委职业健康司负责业务管理、法规司负责统筹管理。 本标准起草单位：深圳市职业病防治院、中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、深圳市宝安区疾病预防控制中心、深圳市盐田区疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：李添娣、李双凤、刘奋、林怡然、赵玮、张文、易娟、尹江伟、徐小作、曹小云。 本标准及其所代替标准的历次版本发布情况为: ——1996年首次发布为WS/T 96- 1996; ——本次为第一次修订。
尿中三氯乙酸测定标准顶空气相色谱法 1范围 本标准规定了测定尿中三氯乙酸的顶空气相色谱法。 本标准适用于职业接触三氯乙烯人员尿中三氯乙酸的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款.其中,注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。 GBZT 210.5 职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法 GBZ/T 224 职业卫生名词术语 GBZ/T 295职业人群生物监测方法总则 3术语和定义 GBZ/T 224和GBZ/T 295界定的术语和定义适用于本标准。 4原理 尿中三氯乙酸经顶空加热脱羧生成三氯甲烷，三氯甲烷经气相色谱柱分离，氢火焰离子化检测器检测，以保留时间定性，测定峰面积或峰高，由外标标准曲线法进行定量。 5仪器 5.1 顶空瓶: 20 mL。 5.2 具盖聚乙烯塑料瓶: 100 mL。 5.3尿比重计。 5.4 电子天平:感量0.1 mg。 5.5 顶空进样器。 5.6 气相色谱仪:配氢火焰离子化检测器。 仪器操作参考条件: a)顶空进样器条件如 下: 1) 炉温: 90 ℃; 2)平 衡时间: 150 min; 3)取样针温度: 100 ℃; 4)传送线温度: 110 ℃; 5)加压时间: 1.0 min; 6) 拔针时间: 0.50 min; 7) 进样时间: 0. 04 min. b)色谱条件如下: 1) 色谱柱:聚乙二醇毛细管色谱柱(30. 0 mX0.32 mmX0.25 um)，或其他等效色谱柱; 2)柱温:初温50℃，保持1min，10℃/min升至80℃，20℃/min升至200℃，保持1min; 3) 汽化室温度: 200 ℃; 4)检测器温度: 250 ℃; 5)载气流量 (N2) : 1. 0 mL/min; 6)空气流量: 300 mL/min; 7)氢气流量: 30 mL/min; 8)尾吹流量 (N2) : 30 mL/min; 9) 分流比: 30: 1。 6试剂 6.1 实验用水：去离子水，色谱鉴定无干扰杂峰。 6.2三氯乙酸钠(C2Cl3NaO2)
：标准品或色谱纯试剂。 6.3三氯乙酸标准贮备液：准确称取2. 2700g三氯乙酸钠，溶于去离子水，定量转移入100 mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度。此溶液为20. 0 mg/mL三氯乙酸标准贮备液(三氯乙酸钠换算为三氯乙酸的系数为0.8813)，置冰箱中冷藏保存，可稳定6个月。 7样品的采集、运输和保存 7.1 依据GBZT 295的要求，用具盖聚乙烯瓶采集接触三氯乙烯人员的工作周末的班末尿50 mL，测比重后，在4 ℃条件下冷藏运输。尿样在4 ℃条件下可保存14d。 7.2 样品空白:在样品采集过程中，随机抽取3份尿样采集容器，加入与尿样等体积的去离子水，并与样品同时运输和储存。 8分析步骤 8.1标准曲线标准系列配制和测定 取6支容量瓶，用去离子水稀释标准贮备液成0. 3 mg/L-100.0 mg/L标准系列溶液。各取5.0mL标准系列溶液置于顶空瓶中，参照仪器操作参考条件，将气相色谱仪调节至最佳测定状态，分别测定标准系列溶液。以保留时间定性，三氯甲烷的峰面积或峰高对相应的三氯乙酸浓度(mg/L) 计算回归方程。回归方程的相关系数应≥0.999。 8.2样品的处理和测定 将尿样从冰箱中取出，放置恢复到室温后，充分摇匀。准确吸取5. 0mL尿样，置于20mL顶空瓶中。样品空白处理方法同样品。用测定标准系列溶液的仪器操作条件测定样品空白和样品的峰面积或峰高，由回归方程得三氯乙酸的浓度(mg/L) 。样品浓度超过测定范围，可重新取尿样用去离子水稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。 8.3 质量控制 检测过程质量控制应按照GBZ/T 295的要求进行。 9计算 9.1 按式(1)计算尿样中三氯乙酸的浓度: ρ1=Po×f
………………..…………………(1) 式中: ρ1一尿样中三氯乙酸的浓度，单位为亳克每升(mgL) ; ρo一由回归方程得三氯乙酸的浓度，单位为毫克每升(mgL) ; f一稀释系数。 9.2按 GBZ/T 295的方法测定尿比重，对检测结果进行比重校正。 10
说明 10. 1本法按照GBZ/T 210.5的方法和要求进行研制。 10.2本法的最低检出浓度为0. 08 mg/L;定量浓度为0. 3 mg/L (按取5. 0 mL尿样计) ;测定范围为0. 3 mg/L~ 100.0 mg/L;相对标准偏差为0.7%~5.8%;加标回收率为93. 8%~104.5 %。 10.3本法可采用其它规格顶空瓶，保持气液相比为3: 1。 10.4 采用多个加热位的自动项空进样器时，三氯乙酸加热脱羧反应可在顶空炉内进行，90 ℃平衡150 min后直接进样;采用单个加热位的顶空进样器或手动项空进样方式时，三氯乙酸加热脱羧反应可在恒温水浴箱中进行(90 ℃保持150 min)，反应完成放至室温后，经45℃平衡20 min进样测定。 10.5本法也可采用三氯乙酸标准品或色谱纯试剂配制标准溶液，由于三氯乙酸固体容易发生潮解，配制的三氯乙酸标准溶液须经氢氧化钠溶液标定后方可使用。 10.6 在本法条件下，三氯乙烯其他代谢产物氯乙酸不出峰，三氯乙醇不干扰三氯乙酸的测定。色谱分离图见图1。
图1尿样中三氯乙酸测定的色谱分离图
注: 1——三氯甲烷;
2——三氯乙醇。 |
