乌梢蛇 Zaocys 《开宝本草》载有乌蛇，《本草纲目》释名为乌梢蛇。马志谓：“背有三棱，色黑如漆，性善，不噬物。”苏颂谓：“其身乌而光，头圆尾尖，眼有赤光。……作伪者用他蛇熏黑，亦能乱真，但眼不光耳。”寇宗 谓：“乌蛇脊高，世称剑脊乌梢，尾细长。”李时珍认为剑脊细尾者为上。可见古今所用乌梢蛇的品种是一致的。 【来源】为游蛇科(Colubridae)动物乌梢蛇Zaocys dhumnades(Cantor)的干燥体。 【动物形态】体长可达2m左右。鼻孔大，椭圆形，位于两鼻鳞间。鼻间鳞宽大于长。眼大；眼后鳞2片。上唇鳞8片，第4、5两片入眼。下唇鳞9～11片，第6片最大。背鳞前段为16行，后段为14行。从颈的后部起背中央有2～4行鳞片起棱。腹鳞186～205片。肛鳞2裂。尾下鳞101～128对。体背青灰褐色，各鳞片的边缘黑褐色。背中央的2行鳞片黄色或黄褐色，其外侧的2行鳞片呈黑色纵线。腹面灰白色。(图16-41) 【产地】主产于浙江、江苏、安徽、江西等省。 【采收加工】多于夏、秋二季捕捉，剖开蛇腹或先剥去蛇皮留头尾，除去内脏，盘成圆盘状，干燥。 【性状鉴别】呈圆盘状，盘径约16cm。表面黑褐色或绿黑色，密被菱形鳞片；背鳞行数成双，背中央2～4行鳞片强烈起棱，形成两条纵贯全体的黑线。头盘在中间，扁圆形，眼大而下凹陷，有光泽。上唇鳞8枚，第4、5枚入眶，颊鳞1枚，眼前下鳞1枚，较小，眼后鳞2枚。脊部高耸成屋脊状，俗称“剑脊”。腹部剖开，边缘向内卷曲，脊肌肉厚，黄白色或淡棕色，可见排列整齐的肋骨。尾部渐细而长，尾下鳞双行。剥皮者仅留头尾之皮鳞，中段较光滑。气腥，味淡。(图16-42) 以头尾齐全、皮黑肉黄、质坚实者为佳。 饮片 ①乌梢蛇段呈短段状，长约3cm。表面乌黑色或绿黑色，有鳞片痕，无光泽，切面黄白色或灰棕色。质坚硬。气腥，味淡。②乌梢蛇肉呈段片状，无皮，无骨，肉厚而柔软，黄白色或灰白色。质韧。气腥，略有酒气。 去蛇皮药材的骨骼鉴别法：躯椎侧面观，棘突高，前后缘较平直。前关节突上的关节面在基部上角，前后椎体下突形状极不相同，即前部椎骨的椎体下突较长，竖刀状，尖端略超过椎体的后隆面，以后逐渐变短，至中部椎骨的椎体下突成棱脊状。脉突侧面观呈马蹄形，左右两片向中线弯曲，彼此靠合。(图16-43)
图16-41 乌梢蛇Zaocys dhumnades（Cantor）
图16-42 乌梢蛇 【显微鉴别】背鳞外表面：鳞片呈黄棕色，具纵直条纹，条纹间距13.7～27.4μm，沿鳞片基部至先端方向径向排列，内含色素斑。此特征为本品粉末鉴定的重要依据。 背鳞横切面：内、外表皮均较平直，真皮不向外方突出，真皮中色素较多。(图16-44)
图16-43 乌梢蛇骨骼 A.鼻骨背面观 B.躯椎侧面观 1.棘突 2.椎弓突 3.前关节突 4.后关节突 5.横突 6.椎体后隆面 7.肋关节面 8.椎体下突
图16-44 乌梢蛇背鳞外表面和横切面 A.背鳞外表面 B.背鳞外表面条纹放大 C.背鳞横切面 1.游离端 2.端窝 3.色素斑 4.条纹 5.基部 6.外表皮 7.色素 8.真皮 9.内表皮 【成分】含蛋白质22.1%、脂肪1.7%。含大量的钙、磷、镁等常量元素，铁、锌、锶等微量元素含量也较高；钡的含量达109.168μg/g，是10种药用蛇中含量最高的，应引起注意。 【生物鉴别】按《中国药典》采用聚合酶链式反应法。模板DNA提取 取本品0.5g，置乳钵中，加液氮适量，充分研磨使成粉末，取0.1g置1.5mL离心管中，加入消化液275μL[细胞核裂解液200μL，0.5mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液50μL，蛋白酶K(20mg/mL)20μL，RNA酶溶液5μL]，在55℃水浴保温1小时，加入裂解缓冲液250μL，混匀，加到DNA纯化柱中，10000r/min离心3分钟；弃掉滤液，加入800μL洗脱液 [5mol/L醋酸钾26μL，1mol/L Tris-盐酸溶液(pH 7.5)18μL，0.5mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液(pH值8.0)3μL，无水乙醇480μL，灭菌双蒸水273μL]，10000r/min离心1分钟；弃掉滤液，用上述洗脱液反复洗脱3次，每次10000r/min离心1分钟；弃掉滤液，再离心2分钟，将DNA纯化柱转移入另一离心管中，加入无菌双蒸水100μL，室温放置2分钟后，10000r/min离心2分钟，取上清液，作为供试品溶液，置零下20℃保存备用。另取乌鞘蛇对照药材0.5g，同法制成对照药材模板DNA溶液。PCR反应 鉴别引物：5′GCGAAAGCTCGACCTAGCAAGGGGACCACA3′和5′CAGGCTCCTCTAGGTTGTTATGGGGTACCG3′。PCR反应体系：在200μL离心管中进行，反应总体积为25μL，反应体系包括10×PCR缓冲液2.5μL，dNTP(2.5mmol/L)2μL，鉴别引物(10μmol/ L)各0.5μL，高保真Taq DNA聚合酶(5U/μL)0.2μL，模板0.5μL，无菌双蒸水18.8μL。将离心管置PCR仪，PCR反应参数：95℃预变性5分钟后，进行30次循环(95℃30秒，63℃45秒)，后延伸(72℃)5分钟。 电泳检测 用琼脂糖凝胶电泳法，胶浓度为1%，胶中加入核酸凝胶染色剂GelRed；供试品与对照药材PCR反应溶液的上样量分别为8μL，DNA分子量标记上样量为2μL(0.5μg/ μL)。电泳结束后，取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中，在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上，在300～400bp应有单一DNA条带。 【浸出物】按醇溶性浸出物热浸法测定，稀乙醇浸出物不得少于12.0%。 【功效】性平，味甘。祛风，通络，止痉。 【附注】据报道，充乌梢蛇的伪品主要是同科动物十余种，其中主要有锦蛇属锦蛇Elaphe carinata (Güenther)、红点锦蛇E.rufodorsata(Cantor)、黑眉锦蛇E.taeniura Cope、双斑锦蛇E.bimaculata Schmidt；鼠蛇属滑鼠蛇Ptyasmucosus(Linnaeus)、灰鼠蛇P.korros(Schlegel)；连蛇属赤链蛇Dinodon rufozonatum (Cantor)；游蛇属草游蛇Natrix stolata(Linnaeus)等。这些伪品蛇与乌梢蛇的主要区别点在于：背鳞行列都是奇数，而乌梢蛇背部鳞片为偶数列。背鳞也可进行显微鉴别。在无背鳞时可用头骨、躯椎骨比较，或用蛋白电泳、薄层色谱、紫外光谱来鉴别。 （中药鉴定学） |
