四、检查 按《中国药典》要求，中成药需要检查的项目大体分为三类： 1.污染型 针对原料药材由于收购或生产过程中可能混入掺杂物或前处理不当而产生的杂质进行检查。如异物、灰分、酸不溶性灰分、重金属、砷盐等，目前又增加了微生物细菌检查，有的品种还要求进行农药残留量检测。如安宫牛黄丸酸不溶性灰分不得过1.0%；黄连上清丸含重金属不得过25mg/kg；牛黄解毒片含砷量不得过2mg/kg。 2.特殊杂质型 原料药材掺假及有毒成分的限量检查，如《中国药典》中三黄片要求检查土大黄苷等；附子理中丸用薄层色谱法限定乌头碱的量。 3.不同剂型的检查内容 固体制剂要求测定水分；酊剂、酒剂要求测定乙醇量、总固体、相对密度、pH值等；片剂、胶囊剂要求测定片重差异、崩解度等。如《中国药典》规定全天麻胶囊水分含量不得过12.0%；三两半药酒乙醇量为20%～25%；癣湿药水(鹅掌风药水)每25mL遗留残渣不得少于0.75g；川贝枇杷糖浆相对密度不低于1.13；八正合剂pH值应为4.0～6.0；麝香保心丸溶散时限不得过15分钟。注射剂的检查项目还有热原、无菌、钾离子、草酸盐、鞣质、蛋白质、不溶性微粒、树脂、溶血与凝聚等。 五、举例 牛黄解毒片 【处方】人工牛黄5g 雄黄50g 石膏200g 大黄200g 黄芩150g 桔梗100g 冰片25g甘草50g 【制法】以上八味，雄黄水飞成极细粉；大黄粉碎成细粉；人工牛黄、冰片研细；其余黄芩等四味加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏或干燥成干浸膏，加入大黄、雄黄粉末，制成颗粒，干燥，再加入人工牛黄、冰片粉末，混匀，压制成1000片(大片)或1500片(小片)，或包衣，即得。 （一）定性鉴别 1.性状鉴别 本品为素片或包衣片，素片或包衣片除去包衣后显棕黄色；有冰片香气，味微苦、辛。 2.显微鉴别 取本品，置显微镜下观察：草酸钙簇晶大，直径60～140μm。不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽。升华物呈无色不规则形片状结晶，加香草醛浓硫酸试液显紫红色。不规则团块由淀粉粒及小颗粒组成，金黄色、黄色或黄棕色，淀粉粒多为多角形或类圆形。(图20-4) 3.理化鉴别 ①取本品5片，研细，加环己烷10mL，振摇，放置30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取冰片对照品，加乙醇制成每1mL含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》四部通则0502)试验，吸取供试品溶液5μL与对照品溶液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 ②取本品2片，研细，加三氯甲烷10mL研磨，滤过，滤液蒸干，加乙醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》四部通则0502)试验，吸取上述二种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇(20∶25∶2∶3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热约 10分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(图19-1)
图19-1 牛黄解毒片（人工牛黄）薄层色谱图 S.胆酸(亮黄色) 1.牛黄解毒片 ③取本品1片，研细，加甲醇20mL，超声处理15分钟，滤过，取滤液10mL，蒸干，残渣加水10mL使溶解，加盐酸1mL，加热回流30分钟，放冷，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷2mL使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚对照品及混合对照品，分别加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》四部通则0502)试验，吸取上述八种溶液各4μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30℃～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及混合对照品色谱相应的位置上，显相同的5个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。(图19-2) ④取本品4片，研细，加乙醚30mL，超声15分钟，滤过，弃去乙醚，滤渣挥尽乙醚，加甲醇30mL，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL，加热使溶解，滴加盐酸调节pH值至2～3，加乙酸乙酯30mL振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》四部通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 ⑤取本品20片，研细，加石油醚(30℃～60℃)-乙醚(3∶1)的混合溶液30mL，加10%亚硫酸氢钠溶液1滴，摇匀，超声5分钟，滤过，弃去滤液，滤纸及滤渣置90℃水浴上挥去溶剂，加三氯甲烷30mL，超声15分钟，滤过，滤液置90℃水浴上蒸至近干，放冷，残渣加三氯甲烷-甲醇(3∶2)的混合溶液1mL使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液。另取人工牛黄对照药20mg，加三氯甲烷20mL，加10%亚硫酸氢钠溶液1滴，摇匀，自“超声15分钟”起，同法制成为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》四部通则0502)试验，吸取上述两种溶液各2～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30℃～60℃)-三氯甲烷-甲酸乙酯-甲酸(20∶3∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点；加热后，斑点变为绿色。
图19-2 牛黄解毒片（大黄）薄层色谱图 S1.芦荟大黄素 S2.大黄酸 S3.大黄素 S4.大黄素甲醚 S5.大黄酚 S.混合对照品(S1～S5) 1.大黄对照药材 2～7.牛黄解毒片 （二）含量测定 照高效液相色谱法(《中国药典》附录ⅥD)测定。 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2)为流动相；检测波长为315nm。理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL中含30μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品20片(包衣片除去包衣)，精密称定，研细，混匀，取约0.6g，精密称定，加70%乙醇30mL，超声处理20分钟，放冷，滤过，滤液置100mL量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，精密量取2mL，置10mL量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。 测定：分别精密吸取对照品溶液5μL与供试品溶液10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每片含黄芩以黄芩苷(C21 H18 O11)计，小片不得少于3.0mg，大片不得少于4.5mg。 （三）检查 三氧化二砷 取本品适量(包衣片除去包衣)，研细，精密称取1.52g，加稀盐酸20mL，时时搅拌1小时，滤过，残渣用稀盐酸洗涤2次，每次10mL，搅拌10分钟，洗液与滤液合并，置500mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取5mL，置10mL量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取2mL，加盐酸5mL与水21mL，照砷盐检查法(《中国药典》四部通则0822第一法)检查，所显砷斑颜色不得深于标准砷斑。 其他 应符合《中国药典》四部通则0101片剂项下有关的各项规定。 |
