第二法 消线法 9.
原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的玉米赤霉烯酮经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条中检测线（T线）上的抗原结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过T线显色与否进行结果判定。 10.
试剂及材料 同3。 11.
仪器和设备 同4。 12.
环境条件 环境温度：10
℃～40 ℃。 空气相对湿度：同5。 13.
分析步骤 13.1. 试样制备 同6.1。 13.2. 提取 准确称取试样5.0 g（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入12.5 mL甲醇+水溶液（3.1.2），用旋涡混合器振荡3 min，离心分层或静置分层，上清液备用。 准确移取400 μL稀释缓冲液（3.1.3）于1.5 mL离心管中，加入上清液(小麦50 μL，玉米80 μL），混匀，待测。 13.3. 测定步骤 同6.3。 14.
质控试验 每批样品应同时进行空白试验和阳性质控试验，可根据检测样品量制定适宜频次的质控试验。 14.1. 空白试验 14.1.1.
试剂空白试验：除不称取试样外，均按13.2和13.3所述步骤操作。 14.1.2.
基质空白试验：准确称取空白试样，按13.2和13.3所述步骤操作。 14.2. 阳性质控试验 准确称取玉米赤霉烯酮含量为60 μg/kg的质控样，按13.2和13.3步骤操作。或准确称取空白试样，加入一定体积的玉米赤霉烯酮标准工作液（3.3.2），使玉米赤霉烯酮添加量为60 μg/kg，按13.2和13.3步骤操作。 15.
结果判定 通过观察检测T线显色与否进行结果判定。 15.1. 无效 同8.1 15.2. 阳性结果 控制C线显色，检测T线不显色，判定为阳性（见图3）。 15.3. 阴性结果 控制C线显色，检测T线显色，判定为阴性（见图3）。 |
