5.3 测定步骤 5.3.1 试纸条与金标微孔测定步骤 吸取150~200 μL样品待测液于金标微孔（3.4.1）中，抽吸5~10次使混合均匀，不要有气泡，40℃温育3 min，将检测试纸条（3.4.2）样品端垂直向下插入金标微孔中，40℃温育5 min，从微孔中取出试纸条，进行结果判定。 5.3.2 检测卡测定步骤 吸取150-200 μL样品待测液于检测卡加样孔（3.4.2）中，室温反应3-5 min，进行结果判定。 5.4 质控试验 每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。 5.4.1 空白试验 称取空白试样，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。 5.4.2 加标质控试验 准确称取空白试样100 g（精确至0.01 g）置于100 mL玻璃溶液瓶中，加入250 μL三聚氰胺标准溶液（1000 μg/mL）（3.3），使试样中三聚氰胺浓度为2.5 mg/kg，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。 注：可参考标准品的说明书配置操作。 6 结果判定要求 通过对比控制线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。目视结果判读如图1。 6.1 无效 控制线（C线）不显色，表明不正确操作或试纸条/检测卡无效。 6.2 阳性结果 6.2.1 消线法 检测线（T线）不显色，控制线（C线）显色，表明样品中三聚氰胺含量高于方法检测限，判定为阳性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图 ）。 6.2.2 比色法 检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色浅或几乎不显色，表明样品中三聚氰胺含量高于方法检测限，判定为阳性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图 ）。 6.3 阴性结果 6.3.1 消线法 检测线（T线）、控制线（C线）均显色，表明样品中三聚氰胺含量低于方法检测限，判定为阴性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图 ）。 6.3.2 比色法 检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当，表明样品中三聚氰胺含量低于方法检测限，判定为阴性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图 ）。 6.4 质控试验要求 空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。 6.5 读数仪测定法 按读数仪说明书要求操作直接读取并进行结果判定。 7 结论 三聚氰胺与灭蝇胺有交叉反应，当检测结果为阳性时，应对三聚氰胺结果进行确证。 8 性能指标 8.1 检测限 2.5mg/kg。 8.2 灵敏度 灵敏度应≥99% 8.3 特异性 特异性应≥85%。 8.4 假阴性率 假阴性率应≤1%。 8.5 假阳性率 假阳性率应≤15%。 注：性能指标计算方法参见附录A。 |
