新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南 为指导各级疾控部门和其他相关机构开展新型冠状病毒肺炎病例标本采集与实验室检测工作，特制定本技术指南。 一、标本采集 （一）采集对象。 新型冠状病毒肺炎疑似病例和聚集性病例，需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者，或其他需要进一步筛查检测的环境或生物材料。 （二）标本采集要求。 1.从事新型冠状病毒检测标本采集的技术人员应 当 经过生物安全 培训（培训合格）和具备相应的实验技能。 2.住院病例的标本由所在医院的医护人员采集。 3.密切接触者标本由当地指定的疾控机构、医疗机构负责采集。 4.根据实验室检测工作的需要，可结合病程多次采样。 （三）采集标本种类。 每个病例必须采集急性期呼吸道标本（包括上呼吸道标本或下呼吸道标本），重症病例优先采集下呼吸道标本；根据临床需要可留取便标本、全血标本、血清标本和尿标本。 标本种类： 1.上呼吸道标本：包括鼻咽拭子、咽拭子等。 2.下呼吸道标本：深咳痰液、肺泡灌洗液、支气管灌洗液、呼吸道吸取物等。 3.便标本肛拭子：留取粪便标本约 10 克（花生大小），如果不便于留取便标本，可采集肛拭子。 4.血液标本：尽量釆集发病后 7 天内的急性期抗凝血，采集量 5ml ，建议使用含有 EDTA 抗凝剂的真空釆血管采集血液。 5.血清标本：尽量釆集急性期、恢复期双份血清。第一份血清应 当 尽早（最好在发病后 7 天内）釆集，第二份血清应 当 在发病后第 3 4 周釆集。采集量 5ml ，建议使用无抗凝剂的真空釆血管。血清标本主要用于抗体的测定，不进行核酸检测。 6.尿标本：留取中段晨尿，采集量 2 3 ml 。 （四）标本采集和处理。 1.鼻咽拭子：采样人员 一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子，拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻），然后缓缓取出拭子，将拭子头浸入含 2 3ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。 2.咽拭子：被采集人员先用生理盐水漱口，采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润（禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起过敏），被采集人员头部微仰，嘴张大，并发 啊 音，露出两侧咽 扁桃体，将拭子越过舌根，在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3 次，然后再在咽后壁上下擦拭至少 3 次，将拭子头浸入含 2 3ml 病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。咽拭子也可与鼻咽拭子放置于同一管中。 3.鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用 3ml 采样液冲洗收集器 1 次（亦可用小儿导尿管接在 50ml 注射器上来替代收集器）。 4.深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于含3ml 采样液的采样管中。如果痰液未收集于采样液中，可在检测前，加入 2 3ml 采样液，或加入痰液等体积的痰液消化液。痰液消化液储存液配方见表 1 。 表1 痰液消化液储存液配方
使用时将储存液用去离子水稀释至50 ml ，与痰液等体积混合使用，或者参照试剂说明进行使用，也可采用痰液等体积的含 1g/L 蛋白酶 K 的磷酸盐缓冲液将痰液化。 5.支气管灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约 30cm 深处），注入 5ml 生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器 1 次，也可用小儿导尿管接在 50ml 注射器上来替代收集。 6.肺泡灌洗液：局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其顶端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水，每次 30 50 ml ，总量 100 250ml ，不应超过 300ml 。 7.粪便标本：取 1ml 标本处理液，挑取黄豆粒大小的便标本加至管中，轻轻吹吸 3 5 次，室温静置 10 分钟，以 8000 rpm离心 5 分钟，吸取上清液进行检测。粪便标本处理液可自行配制，配方见表 2 。 表2 粪便标本处理液配方
也可使用HANK’S 液或其它等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液溶解便标本制备便悬液。如患者出现腹泻症状，则留取粪便标本 3 5ml ，轻轻吹打混匀后，以 8000 rpm离心 5 分钟，吸取上清液备用。 8.肛拭子：用消毒棉拭子轻轻插入肛门 3 5cm ，再轻轻旋转拔出，立即放入含有 3 5ml 病毒保存液的 15ml 外螺旋盖采样管中，弃去尾部，旋紧管盖。 | ||||||||||||||||||||||||||||
