A.3 薄层色谱定性 A.3.1原理 试样中所含阿托品等生物碱经提取后,用薄层分离,再以显色剂显色，与对照标准比较。 A.3.2试剂 A.3.2.1硅胶 G薄层板:厚度0.3 mm-0.5 mm,105°C活化1 h,放干燥器中备用。 A.3.2.2展开剂:甲醇氨水(200+3)。 A.3.2.3显 色剂:称取0.85 g次硝酸铋,加10 mL冰乙酸,加40 mL水,溶解。取5 mL,加5 mL碘化钾溶液(4 g碘化钾溶于5 mL水中),再加20 mI.冰乙酸,加水稀释至100 mL。 A.3.2.4阿托品标准溶液 :称取120.0 mg硫酸阿托品,溶于10mL水中,加氨水(1+1)呈碱性,用三氯甲烷提取二次,每次8 mL，三氯甲烷提取液经少许无水硫酸钠脱水,滤人20 mL具塞比色管中,再用少许三氯甲烷洗滤器,洗液并人比色管中,加三氯甲烷至20mL,此溶液每毫升相当于5.0 mg阿托品。 A.3.2.5东莨菪 碱标准溶液:称取145.0 mg氢溴酸东莨菪碱,溶于10ml.水中,加氨水(1+ 1)呈碱性，用三氯甲烷提取二次,每次8 mL,三氯甲烷提取液经少许无水硫酸钠脱水,滤人20 mL具塞比色管中，再用少许三氯甲烷洗滤器,洗液并入比色管中，加入三氯甲烷20 mL,配成每毫升相当于5.0 mg东莨菪碱。 A.3.3分析步骤 在薄层板下端2 cm处,点10 μL阿托品及东莨菪碱标准溶液,30μL-100 μL试样提取浓缩液,各点间距1.5 cm,置于预先用展开剂饱和的展开槽中,待溶剂前沿上展至10 cm~15 cm取出,挥干展开剂,喷显色剂呈现橙红色斑点为阳性反应。
附录B 麦角检验方法
B.1 鉴定 B.1.1形态特征 麦角呈长条形或香蕉形,有时略扁,长3 mm-10 mm,粗1 mm-7 mm,外面呈黑色或紫黑色,有纵沟与横裂纹,质脆，易折断,断面扁形、钝多边形或椭圆形,中心呈白色、灰白或粉白色。菌核休眠后萌发会产生子座;不孕子座柄细长,头部扁球形,直径1 mm-2 mm,红褐色,外缘生子囊壳。 B.1.2 组织切片 将麦角泡入水中,浸泡24 h,使膨胀,夹在土豆或萝卜中间以固定用小手术刀切成尽可能薄的小片,用次甲基蓝溶液(1g/L)显色,在显微镜下观察，其组织紧密。
B.2麦角红素和麦角生物碱定性 B.2.1试剂 B.2.1.1酒石酸溶液(20 g/L)。 B.2.1.2无水乙醚 。 B.2.1.3饱和碳酸氢钠溶液。 B.2.1.4氨水(1+1)。 B.2.1.5三氯甲烷。 B.2.1.6对二甲氨基苯甲醛溶液:称取0.125 g对二甲氨基苯甲醛,加100mL稀硫酸(65 mL硫酸缓缓倒人35 mL水中,混匀,冷却)溶解,然后加0.1 mL三氯化铁溶液(50g/L) ,混匀。 B.2.1.7无水乙醇:紫外光灯波长365 nm下观察无荧光。 B.2.2分析步骤 取20粒可疑麦角于研钵中,研碎,加酒石酸溶液(20 g/L)研成黏稠状,加乙醚仔细研磨三次,每次10 mL,合并乙醚层于试管中,保留残渣于研钵内。在试管内加0.5 mL饱和碳酸氢钠溶液,振摇,碳酸氢钠溶液层变红色,即表示检出麦角红。 取保留的残渣,加氨水(1+ 1)研磨呈碱性,用三氯甲烷提取三次,每次10 mL,合并三氯甲烷层,分成两部分。一部分小心加2 mL对二甲氨基苯甲醛溶液,在两液层接触面呈蓝紫色环,数分钟后,三氯甲烷层均显蓝色,即表示检出麦角生物碱。另- -部分三氯甲烷提取液置于试管中,在热水浴上使三氯甲烷挥尽,残留物加无水乙醇溶解,在波长365 nm紫外光灯下观察有强烈蓝色荧光,即表示检出麦角生物碱。
B.3计算公式 称1 000 g(m1 )样品,检出麦角后称量(m2),精确至1 g。麦角含量(w)以质量分数(%)表示,按式(B.1)计算: w= m2/m1×100%.............( B.1 ) 式中: W——样品中麦角含量,%; m2——样品中麦角质量,单位为克(g); m1——样品质量,单位为克(g)。 结果保留三位有效数字。
[1] BYE, SOSAV.Molecular Phylogeny of the JimsonweedGenus Datura( Solanaceae)[J]. Sys-tematic Botany, 2013,38(3):818-829. | 
发表于 2019-11-20 13:40:35
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